苦参药用部位发育解剖暨黄芪道地药材的年限鉴别及其次生代谢产物积累研究

来源 :安徽中医药大学 | 被引量 : 24次 | 上传用户:WYQ1987412
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[目的](1)阐明苦参药材中同心环纹的实质及异常构造的产生,进一步讨论苦参的入药部位争议问题;(2)报道几个产地不同年限黄芪根中生长轮情况,根据生长轮鉴别道地产区的黄芪,并将生长轮与其实际生长年限进行比较,阐明黄芪中生长轮与生长年限的关系;(3)阐明黄芪老根中空心结构的实质及空心结构的发育过程;(4)结合“器官性状-显微结构-组织化学-含量测定”,探索黄芪主要活性成分部分积累的规律。[方法]针对苦参的入药部位争议问题,进行产地与市场的实地调查;运用发育解剖研究方法,针对苦参中的同心环纹和异常构造问题进行连续制片观察;对具有空心的黄芪进行连续制片观察;运用石蜡切片技术与徒手制片技术对不同产地不同年限黄芪中的生长轮现象进行观察研究,总结生长轮与实际生长年限的关系;根据显色反应原理,对黄芪根中的黄酮、皂苷成分进行组织化学定位;采用HPLC-DAD和HPLC-ELSD方法测定山西浑源县1-5年生和8年生无空心黄芪中黄酮和皂苷六种成分的含量;将粗度相近的黄芪分为无空心、具有小部分空心和具有大部分空心三种性状,分别依据组织结构将各部位进行剥离,测定各部分的毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花苷、毛蕊异黄酮、芒柄花素、黄芪甲苷、黄芪皂苷Ⅱ六种成分的含量,测定山西浑源县具有空心与不具有空心的黄芪中六种成分的含量;测定山西浑源县、内蒙赤峰市、甘肃渭源县三个产地两年生黄芪中六种成分的含量。[结果]北方部分地区生长的苦参存在横走根状茎(文中统称为“根状茎”),其与根在外观和显微特征方面都存在差异;苦参根中的异常结构是由于次生木质部中产生了大量薄壁细胞,其中一些薄壁细胞恢复分生能力转化为异常形成层所产生;苦参横切面中的同心环纹与生长轮无关,从外向内依次是由韧皮纤维束呈断续的环、形成层环,以及次生木质部中的薄壁细胞环带组成。山西浑源的黄芪中具有明显的生长轮,且生长轮的数目与生长年限一致,吉林集安黄芪木质部中的纤维束环可有助于判断生长轮数目,甘肃渭源县和内蒙古赤峰的黄芪中未见生长轮;黄芪中的空心是由于次生木质部中的一些薄壁细胞转化为异常的木栓形成层所导致。山西不同年限黄芪中的四种异黄酮成分的含量测定结果表明:5年生黄芪中四种异黄酮成分的含量最高,其次是两年生黄芪;不同组织结构中的四种异黄酮成分的含量均存在一定的差异,其中空心部位与周皮部位中四种异黄酮成分的含量均相近,且含量最低,三个产地2年生黄芪中的四种异黄酮成分的含量由高到低依次是甘肃、山西、内蒙。皂苷成分的组织化学定位的结果表明:黄芪周皮和次生韧皮部中的皂苷类成分明显高于次生木质部。黄芪甲苷与黄芪皂苷Ⅱ的含量测定结果表明:生长1年,3年,5年的黄芪中两种皂苷成分的含量较其他年限的高;周皮部位的两种皂苷成分含量最高,次生韧皮部中的两种皂苷类成分的含量明显高于次生木质部;三个产地2年生黄芪中的两皂苷成分的含量由高到低依次是山西、甘肃、内蒙。[结论]苦参的入药部位为根,建议苦参饮片中“环状年轮”的描述改为“环状结构”;可根据黄芪中生长轮的差异来判断黄芪的道地产区——山西浑源的黄芪,并且可根据生长轮数目来判断该产区黄芪的生长年限;综合分析不同产地几种活性成分的含量,本研究认为山西浑源的黄芪质量最优,这与山西浑源为黄芪的道地产区一致;通过比较山西不同年限黄芪中几种活性成分的含量,建议黄芪的采收在2年后,最佳采收年限为5年;综合比较空心黄芪与不空心黄芪中活性成分的含量,认为若空心所占据的部位较小,则黄芪空心对黄芪质量的影响较小;本研究中的黄芪不同组织结构中几种活性成分的积累规律,可为黄芪资源的合理利用提供依据。
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