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恶性肿瘤发病率正逐年增加,已成为目前人类的首要致死原因,肿瘤的治疗愈加受到关注。S100A16基因为S100基因家族的特殊成员,与恶性肿瘤密切相关。早期研究表明该基因在肿瘤细胞中过表达,但后期研究发现其在不同肿瘤细胞中发挥不同作用,预示着S100A16基因在肿瘤中有特殊表达机制与功能作用。生长期梅花鹿鹿茸因其快速生长速度而成为恶性肿瘤研究的重要模型。该基因在鹿科动物基因的研究中鲜见报道,因此对梅花鹿S100A16基因研究具有重要意义。本研究根据GenBank数据库中牛、绵羊S100A16基因序列设计引物,以梅花鹿鹿茸顶端组织cDNA为模板,采用RT-PCR技术和分子克隆技术获得S100A16基因的cDNA序列;通过Q-PCR技术对梅花鹿鹿茸生长前、中和后期间充质组织中S100A16基因表达量的差异进行分析;构建pEGFP-C1-S100A16真核表达载体并转染293T细胞,通过Q-PCR技术分析过表达的S100A16基因对293T细胞中NOTCH1、ZEB1、ZEB2、NANOG、CDKN1A、PSMD9和TP53基因表达量的影响。研究结果表明:(1)梅花鹿S100A16基因CDS区全长312 bp,编码103个氨基酸;蛋白含有11个磷酸化位点,有跨膜结构域,无信号肽,为在细胞内发挥作用的稳定蛋白;蛋白在C端含有S100蛋白家族经典的EF螺旋结构域,Ca2+结合环由12个氨基酸组成,其N端EF螺旋结构域Ca2+结合环由15个氨基酸组成;蛋白C端含有FGF-1蛋白结合位点;蛋白二级结构主要由α-螺旋和无规则卷曲构成;三级结构显示该蛋白有两个离子结合位点。梅花鹿S100A16蛋白与人蛋白功能结构和细胞定位相似。(2)梅花鹿S100A16蛋白氨基酸序列与东欧马鹿同源性最高,为100%,其次为绵羊与牛,均为98%。利用S100A16蛋白氨基酸序列构建系统进化树,分析表明S100A16蛋白在进化上比较保守,符合功能蛋白的特点。(3)梅花鹿鹿茸生长中期间充质组织的S100A16基因表达量低于前期和后期,该基因在鹿茸生长过程中发挥重要作用。(4)梅花鹿源pEGFP-C1-S100A16真核表达载体构建成功,293T细胞转染率达70%-80%,并成功表达。(5)转染pEGFP-Cl-S100A16真核表达载体与转染pEGFP-C1空载体的293T细胞相比,ZEB1和ZEB2基因表达量极显著下调(P<0.01),MOTCH1、NAMOG、PSMD9和CDKN1A基因表达量显著下调(P<0.05),TP53基因表达量不变(P>0.05)。293T细胞中梅花鹿S100A16基因过表达可下调某些促癌基因的表达。