【摘 要】
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目的:收集来源于黔北地区特殊生境土壤中的放线菌进行分离鉴定,发掘潜力菌株与新型菌株,为开发新型抗生素及活性次级代谢产物提供基因资源和放线菌种;对贵州特殊生境梵净山来
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目的:收集来源于黔北地区特殊生境土壤中的放线菌进行分离鉴定,发掘潜力菌株与新型菌株,为开发新型抗生素及活性次级代谢产物提供基因资源和放线菌种;对贵州特殊生境梵净山来源链霉菌分离菌株Streptomyces sp.FJS 31-2菌株的次级代谢产物进行发酵,分离、纯化,以期获得结构新颖的活性次级代谢产物。方法:采集黔北地区凤凰山、大板水、四洞沟和佛光岩等未经人为破坏的特殊生境中的土样,利用GYM培养基、自来水琼脂培养基和ISP2,分离并纯化单菌落;利用基因筛选和活性筛选相结合的方式筛选分离菌株抗MRSA的活性;对发酵产物进行活性测试,并借助高效液相对菌株活性部位的范围进一步缩小;采取大规模发酵、萃取、正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶柱层析及高效液相制备色谱法等手段分离、纯化目标化合物。结果:分离纯化获得318株分离菌株,并筛选出一批拥有良好抗MRSA活性的菌株。此外通过对已知菌株16s RNA系统进化分析,发现新菌株12株;对其中99余株活性菌株进行了基因筛选和抗性测试;从链霉菌Streptomyces sp.FJS 31-2中分离得到两个单体化合物。结论:16S rRNA进行扩增后比对和系统进化树分析对比,可以发现分离菌株中有36.16%的菌株具有抗MRSA活性,显示出黔北地区的抗MRSA活性菌种资源具有很大开发潜力;目的菌株链霉菌Streptomyces sp.FJS 31-2可产生的新型卤化天然产物,具有重要的医用价值。
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