近年来,物理及电子技术的发展推动了时间分辨荧光技术的发展,多种具有超快时间分辨能力的测量与标准仪器相继出现。与传统稳态荧光技术相比,时间分辨荧光技术可以提供荧光的寿命及不同寿命分量的分布及比例等信息,在生命科学、分析化学、纳米科学等领域具有广泛的应用。通过测量仪器响应函数并通过卷积算法拟合实验数据是最常用的提高时间分辨率的方法,在本研究中,我们采用NaI淬灭荧光素钠的方法获得了黄绿波段的超短寿命的荧光发射,可以用来测量时间分辨荧光仪器的仪器响应函数。我们采用此方法测量的仪器响应函数来拟合荧光素、黄色荧光蛋白、绿色荧光蛋白等荧光,获得了满意的实验结果。此方法不仅解决了时间分辨激发光谱测量中采用散射样品测量在不同探测波长反复测量仪器相应函数的问题,更重要的是避免了实验中由系统颜色效应带来的误差。本论文的主要研究成果如下：1.采用NaI淬灭的荧光素钠来测量仪器响应函数,获得了黄绿波段的仪器响应函数测量标准品。并且提高了染料的溶解度,提高了荧光信号的强度。2.采用具有飞秒时间分辨率的基于光学频率上转换的荧光寿命测量装置精确测量了淬灭荧光素钠的荧光寿命为17ps,此寿命远远小于大多数光电探测器的响应时间,证明了此标准品可以作为仪器时间响应函数测量的有效性。3.采用此方法测量的仪器响应函数来拟合荧光素纳、黄色荧光蛋白、绿色荧光蛋白等荧光衰减光谱,提高了其荧光成像的时间分辨率,为以后在细胞内的荧光成像探测打下良好的基础。