论文部分内容阅读
研究目的转录因子作为最佳靶位干预Th细胞的分化已成为治疗免疫性疾病的热点,但其在“运动性免疫抑制”中的作用尚不清楚,本研究拟通过动物模型,以SD大鼠为试验对象,观察递增负荷运动训练对转录因子的影响,并探讨其与运动性免疫失衡调控之间的关系,试图从基因水平解释运动性免疫抑制发生的可能机制。研究方法本研究以SD纯种雌性大鼠为实验对象,进行递增负荷跑台训练。试验分组为安静对照组(C)、训练1周组(W1)、训练3周组(W3)和训练9周组(W9)。用一般情况、体重、生化指标等监控大鼠训练过程中的机能变化。分别在第1、3、9周训练后的36小时采样。Hb检测采用全自动血液分析仪检测,睾酮(T)和皮质酮(Cort)采用酶联免疫法检测;ELISPOT检测大鼠脾脏淋巴细胞分泌的Th1型细胞因子IFN-γ和Th2型细胞因子IL-4的表达量;并用荧光定量PCR实验技术检测大鼠外周血白细胞中IRF、STAT4、GATA3、CCR4的mRNA表达量的变化。研究结果1、一般情况:递增负荷训练前2周大鼠能按给定负荷完成训练;第3周开始,运动能力有所下降;最后三周大鼠表现为反应迟钝、毛发无光,每次训练结束后呈“甲鱼状”俯卧,已达过度疲劳状态。2、体重变化:训练组从第6周开始不再增加,而对照组始终保持正性增长,实验组和对照组相比具有非常显著性差异(p<0.01)。3、血红蛋白、血浆睾酮、血浆皮质酮浓度变化:训练1周后,血红蛋白和对照组相比下降,统计学处理差异有非常显著性(p<0.01),血浆T、Cort和对照组相比呈下降态势,但无显著性差异;3周的递增负荷训练后,Hb仍处于较低水平,但无显著性变化,血浆T、血浆Cort水平出现逆转,Hb、T、Cort浓度明显下降,与对照组相比,均有非常显著性差异(p<0.01)。4、递增运动负荷训练过程中免疫机能的变化:①T h1型细胞因子IFN-γ在第1周跑台训练后升高,统计学处理具有非常显著性差异(p<0.01),而第3周的跑台训练后表现为明显的抑制,统计学处理具有显著性差异(p<0.05),9周训练结束后仍表现为下降,但已无显著性差异。②9周训练过程中,Th2型细胞因子IL-4虽有变化,但均无显著性差异。5、递增负荷训练过程中转录因子的变化:中等强度负荷训练后,IRF/GATA3、STAT4/GATA3呈下降趋势,其中STAT4/GATA3下降具有显著性(p<0.05)。大强度负荷训练后,IRF/GATA3、STAT4/GATA3、IRF/CCR4、STAT4/CCR4均出现上升趋势。9周训练结束后,。而IRF/GATA3、STAT4/GATA3、STAT4/CCR4均下降,其中STAT4/GATA3的下降,统计学处理具有显著性(p<0.05);IRF/CCR4呈上升趋势。结论1、1周中等强度训练后,机体免疫机能向Th1方向漂移,机体产生保护性抑制;3周大强度运动后,免疫平衡暂时向Th2方向漂移。9周递增负荷过度训练结束后免疫机能继续向Th2方向漂移。2、转录因子的保护性调控作用被激活发生在3周大强度运动诱导的Th2型漂移之后。3、用转录因子的相对值反映Th细胞分化过程中基因调控与细胞因子表达之间的关系更为合适。其中STAT4/GATA3具有最高的敏感性,这也为进一步研究运动性免疫抑制的机制提供了敏感的靶基因。