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禽腺病毒血清4型（Fowl Adenovirus serotype 4,FAdV-4）属于Ⅰ亚群禽腺病毒。对FAdV-4的研究可追溯至1971年。但是由于之前发现的FAdV-4毒株都属于低致病性的腺病毒,因此对其的研究进度一直处于较慢状态。2015年由FAdV-4引起的肝炎-心包积液综合征（Hepatitis Hydropericardium Syndrome,HHS）在山东、河南、浙江等地大面积爆发,对华东地区的家禽养殖业造成了严重的打击,这引起了中国乃至国际社会对FAdV-4的重视。对FAdV-4的Fiber进行反向遗传改造得到重组病毒。为研究两个Fiber对F AdV-4的复制增殖和毒力影响,分别构建了删除Fiber1的FAV4XF1GFP和删除F iber2的FAV4XF2GFP重组病毒。结果表明FAV4XF1GFP可以拯救但不能正常复制增殖。用pcDNA3-FAV4F1辅助时,FAV4XF1GFP可以复制增殖。FAV4XF2GF P可以正常复制增殖,但其复制增殖能力减弱。研究Fiber Knob蛋白对FAdV-4感染细胞过程的阻断作用。本研究以人5型腺病毒为载体,构建真核表达载体HAd5XE3-F1H6和HAd5XE3-F2H6,接种293T细胞以表达和纯化Fiber1和Fiber2的Knob区域。蛋白纯化后,用BCA试剂盒测定浓度,然后进行SDS-PAGE电泳和Western Blot鉴定,之后进行阻断实验。由Fiber1蛋白阻断实验结果分析,蛋白浓度在0-1μg/mL时,荧光数量基本不变;在5-10μg/mL时,荧光数量明显减少,荧光比例从80%左右降到20%。由Fiber2蛋白阻断实验结果分析,蛋白浓度在0-5μg/mL时,荧光比例仅略有降低,从85%降低至80%左右。研究删除Fiber2 FAdV-4的复制增殖。设计以亲本病毒FAV4GFP为对照,测定FAV4XF2GFP的生长曲线、病毒空斑试验、鸡胚实验。由生长曲线可知FAV4XF2GFP生长周期与亲本病毒FAV4GFP相同。细胞病毒产量为亲本病毒FAV4GF P的10%。由病毒空斑试验可知FAV4XF2GFP与亲本病毒FAV4GFP相同颗粒数接毒产生的噬斑数量基本相同。噬斑面积为FAV4GFP的27.1%。由鸡胚实验可知FAV4XF2GFP14d存活率为40%,亲本病毒FAV4GFP 12d存活率为0%。同日死亡鸡胚的肝脏病毒滴度FAV4XF2GFP组是FAV4GFP组的10-2～10-3倍。综上,Fiber1是FAdV-4复制增殖的必需蛋白。Fiber2是FAdV-4复制增殖的非必需蛋白。Fiber1是FAdV-4感染细胞的关键蛋白。