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目的:通过在饲料中添加不同浓度Zn2+,研究Zn2+长期胁迫对黑水虻幼虫血淋巴中能量物质、热量值、酶活及血细胞凋亡的影响。探讨Zn2+长期胁迫对黑水虻幼虫能量代谢及生理功能影响,为粪便无害化处理及副产品的研发提供理论依据。 方法:将不同浓度Zn2+(0、75、150、300、600、1200mg/kg)添加到人工饲料中,对黑水虻幼虫进行连续5代的饲喂;紫外分光光度法检测第1、3、5代5龄初及6龄末幼虫血淋巴中蛋白、总糖、脂肪含量、热量值;利用SOD、GST、及GST-Px试剂盒测定各酶活力和MDA含量;流式细胞仪检测黑水虻幼虫血细胞的凋亡率。 结果: (1)600-1200mg/kg Zn2+胁迫显著降低了第3、5代黑水虻幼虫(0-120 h)血淋巴中三大能量物质(总糖、蛋白、脂肪)含量及热量值并显著低于对照组;在300 mg/kg Zn2+浓度处理组,第1、3代黑水虻幼虫(0-120h)血淋巴中三大能量物质含量及热量值达到最高;第5代黑水虻幼虫(0-120h)血淋巴中三大能量物质含量及热量值除300mg/kg处理组外,其他各处理组各时间段均显著低于对照组。同一处理浓度Zn2+胁迫下,第5代黑水虻幼虫(0-120h)血淋巴中三大能量物质含量及热量值均低于第1、3代。 (2)Zn2+处理浓度在75-300 mg/kg范围内,第1、3、5代黑水虻幼虫血淋巴中GST及GSH-Px活性随着Zn2+处理浓度的增加而升高,在处理浓度为600-1200 mg/kg范围内,GST及GSH-Px活性则随Zn2+处理浓度的增加而降低。而SOD活性则在各个处理浓度下均随Zn2+处理浓度的增加而降低。 (3)黑水虻幼虫血淋巴中GSH-Px活性及SOD活力随世代增加而降低,第5代GSH-Px、SOD活性低于第1、3代;GST活性则随胁迫世代的增加而升高,在浓度为75-600mg/kg处理范围内,第5代幼虫血淋巴中GST活性高于第1、3代。 (4)当Zn2+处理浓度在75-300 mg/kg时,第1、3、5代黑水虻幼虫血细胞的凋亡率和MDA含量变化不明显,随处理浓度增加至600-1200 mg/kg时,显著诱导了黑水虻幼虫血细胞的凋亡和脂质过氧化反应;第5代血细胞凋亡率及MDA含量显著高于第3代,第3代显著高于第1代。 结论: (1) Zn2+胁迫显著影响了黑水虻幼虫血淋巴中三大能量物质含量及热量值。在300 mg/kg处理浓度时,三大能量物质含量及热量值达到最高,1200mg/kg处理浓度时达到最低,且同一处理浓度下第5代幼虫血淋巴中三大能量物质含量及热量值均低于第1、3代。 (2) Zn2+胁迫浓度为75-300mg/kg时,黑水虻幼虫血淋巴中GSH-Px及GST活性随处理浓度升高而上升,600-1200 mg/kg Zn2+胁迫时随处理浓度升高而下降。同一处理浓度Zn2+胁迫下第5代黑水虻幼虫血淋巴中GST活性高于第1、3代;GSH-Px活性为第3代高于第1、5代。各处理浓度下,SOD活性均随Zn2+浓度的增加而降低,且第5代显著低于第1、3代。 (3)Zn2+处理浓度在600-1200 mg/kg时,可显著诱导第1、3、5代黑水虻幼虫血细胞凋亡和脂质过氧化反应,并随胁迫世代的增加依次增大。