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目的(1)通过正交试验确定无患子的提取方法,采用大孔吸附树脂技术进行无患子总皂苷的纯化工艺研究;(2)建立一种能测定无患子总皂苷含量的HPLC分析方法;研究无患子药材和无患子总皂苷的HPLC指纹图谱;(3)评价无患子皂苷的表面活性等性能。方法(1)采用正交试验设计,探讨提取时间、料液比及乙醇浓度等因素对无患子总皂苷提取率的影响,确定最佳条件;以常春藤皂苷元洗脱率为考察指标,选用9种型号的大孔吸附树脂进行分离纯化。(2)以常春藤皂苷元对照品为对照,采用反相高效液相色谱法测定无患子中皂苷含量。(3)参照中药注射剂质量控制中所采用的指纹图谱技术,分别对10批无患子药材、10批无患子总皂苷提取物的HPLC图谱进行相似度比较,建立无患子及无患子总皂苷的HPLC指纹图谱。(4)测定无患子总皂苷提取物的临界胶束浓度、表面张力及起泡性能,并研究其影响因素。结果(1)通过正交试验设计,无患子总皂苷的最佳提取工艺为:提取溶剂为90%乙醇,料液比为1:12,提取次数为3次,提取时间为2.5h-2.0h-1.5h,在该条件下,干膏收率为4.17%,常春藤皂苷元含量为2.315g;大孔吸附树脂分离纯化的最佳条件为:采用DM130型大孔吸附树脂,对无患子总皂苷的饱和吸附量为85.59(mg/g干树脂),洗脱率达到93.1%;吸附液浓度为0.5g药材/mL(常春藤皂苷元为11.24mg/mL),pH值为5.3,上样量为5.0mL/g(吸附液体积:树脂质量),上样速率为1mL/min;解析剂为pH值为6.0的95%乙醇,用量为6BV,解析速率为1mL/min。(2)实验建立的色谱条件,能准确测定无患子中常春藤皂苷元的含量。常春藤皂苷元进样量在1.006ug-6.036μg范围内与峰面积线性关系良好,线性回归方程为y=495945x-14102,R~2=0.9996。常春藤皂苷元的平均加标回收率为99.94%。方法学考察表明,该法简单、准确、稳定可靠。(3)采用国家药典委员会颁布的“中药指纹图谱相似度评价系统2004版A”计算10批无患子药材及10批无患子总皂苷HPLC图谱的相似度,结果表明,建立的指纹图谱方法可靠,可以作为无患子指标检测和质量控制的方法。(4)无患子总皂苷溶液具有很低的临界胶束浓度和表面张力,在一定的范围内受一些因素(pH、温度、盐度及水硬度)影响也不大;其有很好的起泡性能,洗涤效果好。结论无患子提取分离纯化工艺可行,可作为无患子放大生产工艺;无患子指纹图谱方法可行,可作为无患子产品质量控制方法;HPLC含量测定方法稳定可靠,可作为无患子总皂苷含量测定方法;无患子总皂苷溶液有很强的表面活性,为全方位开发和研制无患子天然表面活性剂及其相关产品提供理论依据。