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背景慢性心力衰竭是许多心血管疾病的终末期阶段,以心脏的结构和/或功能异常为主要特征。心力衰竭是慢性免疫系统激活的炎症疾病,提示正常的免疫抑制能力不足。Th17细胞和Treg细胞均来自幼稚的Th细胞,具有相反的作用,在免疫应答和调节中起重要作用。Th17/Treg平衡参与了心力衰竭的病理过程,维持两者的相对平衡,可以延缓心衰的发生、发展。前期临床试验中,益气活血方药可以缓解患者的临床症状,改善患者生存质量,临床疗效显著。但益气活血方是否可以通过增加内源性保护性细胞或抑制炎症细胞,从双向调控免疫介导的炎症反应而改善心肌重构,值得深入研究。目的本研究以左冠状动脉结扎建立慢性心力衰竭大鼠模型,观察益气活血方干预慢性心力衰竭大鼠的效应,研究Th17/Treg失衡在CHF中发生、发展中的作用,进一步从PD-1/PD-L1通路探讨益气活血方干预慢性心力衰竭大鼠的起效机制。方法采用SD大鼠左冠状动脉结扎模型为研究对象,术后4周后评价心力衰竭模型成立,将模型制备成功的大鼠分为假手术组、模型组、卡托普利组、益气活血方低剂量组、益气活血方中剂量组、益气活血方高剂量组,干预给药8周。彩色多普勒超声检测大鼠心脏结构和功能;血清NT-pro BNP检测评价大鼠心衰程度,Masson染色观察心肌损伤,HE染色观察脾脏组织病理改变,流式细胞技术检测脾脏内Th17、Treg细胞的水平,免疫荧光染色检测大鼠心肌组织Th17、Treg阳性细胞的表达水平以及ELISA检测血清IL-10、IL-17的水平,RT-PCR和Western Blot检测心脏中PD-1、PD-L1基因和蛋白的表达情况。结果1与假手术组相比,模型组大鼠的EF明显降低(P<0.01),FS明显降低(P<0.01),IVSd、IVSs明显减低(P<0.01或P<0.05),LVIDd、LVIDs显著增大(P<0.05或P<0.01),NT-pro BNP显著升高(P<0.01);心肌梗死区有大量蓝色胶原纤维沉积,梗死区边缘纤维化面积大;大鼠脾脏充血,组织结构改变,红髓、白髓分界不清。与模型组比较,卡托普利组、益气活血方各组均可以不同程度升高EF、FS数值(P<0.01或P<0.05),改善IVSd厚度(P<0.05),LVIDs减小(P<0.05),降低血清NT-pro BNP水平(P<0.01),心肌纤维化水平有所减轻,不同程度的改善了脾脏病理损伤,延缓心肌重塑。2与假手术组相比,模型组脾脏Treg细胞百分比明显降低(P<0.05),心肌CD25+FOXP3阳性细胞表达率减少(P<0.05),血清IL-10水平显著降低(P<0.01),脾脏Th17细胞百分比明显升高(P<0.05),心肌CD4+IL-17阳性细胞表达率增加(P<0.01),血清IL-17水平显著升高(P<0.05),Th17/Treg细胞比值显著升高(P<0.01);与模型组比较,卡托普利组及益气活血方各组均可以不同程度升高大鼠脾脏Treg细胞百分比(P<0.05),心肌CD25+FOXP3阳性细胞表达率增加(P<0.01),升高血清IL-10的水平(P<0.01或P<0.05),降低脾脏Th17细胞百分比(P<0.05),心肌CD4+IL-17阳性细胞表达率减少(P<0.01或P<0.05),降低血清IL-17的水平(P<0.01),降低Th17/Treg细胞比值(P<0.01或P<0.05)。3与假手术组相比,模型组大鼠心肌中PD-1m RNA、PD-L1m RNA明显降低(P<0.01),PD-1、PD-L1蛋白表达水平明显下降(P<0.01);与模型组相比,卡托普利组及益气活血方各组可以升高PD-1m RNA、PD-L1m RNA水平(P<0.01或P<0.05),升高PD-1、PD-L1蛋白表达水平(P<0.01或P<0.05)。结论1益气活血方能够有效改善心肌梗死后慢性心力衰竭大鼠的心功能,减轻心肌纤维化水平,延缓心室重构。2益气活血方能够通过增加Treg细胞、减少Th17细胞的水平,改善Th17/Treg细胞比例的失衡从而双向调控免疫介导的炎症反应,进而改善心肌重构。3益气活血方可以调节慢性心力衰竭大鼠Th17/Treg免疫失衡,其机制可能与调节PD-1/PD-L1通路免疫功能有关。