MHD患者Klotho基因单核苷酸多态性及其表达蛋白与钙磷代谢、骨质疏松的相关性研究

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研究目的:探讨维持性血液透析(maintenance hemodialysis,MHD)患者Klotho G-395A位点单核苷酸多态性(Single Nucleotide Polymorphism,SNP)分布及表达蛋白与钙磷代谢、骨质疏松的相关性。研究对象及方法:选择2018年12月-2019年12月期间在中国人民解放军联勤保障部队第九〇八医院门诊长期规律血液透析(血透时间>3个月)患者101例为MHD组,健康体检者80例为对照组。采用等位基因特异性引物PCR技术检测MHD患者Klotho G-395A SNP,酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测其血清Klotho蛋白、成纤维细胞生长因子(FGF23)水平,收集钙磷相关生化指标。双能X射线吸收仪测量股骨颈骨密度,按照WTO标准将MHD患者分为骨量正常组、骨量减少组、骨质疏松组。卡方检验、独立样本t检验、单因素方差分析及Pearson相关分析用于各组生化指标间差异性或相关性分析,多因素采用多元有序Logistic回归分析。结果:(1)MHD组和对照组基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡,具有一定的群体代表性。(2)MHD组和对照组在基因亚型及基因频率分布差异有统计学意义(P<0.05),且MHD组患者G等位基因频率较对照组高。(3)MHD组和对照组在血清钙磷、iPTH水平上差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)MHD组不同的基因型中,Klotho蛋白和FGF23水平差异具有统计学意义(P<0.05)。(5)MHD组中,骨量异常患者占83.2%。Klotho蛋白水平、透析龄、年龄及|T|值在不同的骨密度间差异有统计学意义(P<0.05),透析龄在骨量正常组和骨量减少组、骨量正常组和骨质疏松组间,差异有统计学意义(P<0.05)。|T|值在骨量减少组和骨量正常组、骨量减少组和骨质疏松组间,差异有统计学意义(P<0.05)。血清钙磷及FGF23水平,三组之间比较差异无统计学意义。(6)MHD组中,不同性别间骨质疏松频率分布存在统计学意义(P<0.05)。Klotho蛋白和FGF23水平在两组间差异无统计学意义。不同基因型间骨质疏松频率分布无统计学差异。(7)MHD组患者Klotho蛋白水平与FGF23和血清磷水平呈负相关(r=-0.312,P=0.002;r=-0.277,P=0.005),与血清钙水平呈正相关(r=0.223,P=0.025),与iPTH水平无相关性。FGF23水平与血清磷和iPTH水平呈正相关(r=0.863,P=0.000;r=0.216,P=0.03),与血清钙水平无相关性。|T|值与Klotho蛋白水平呈正相关(r=0.205,P=0.039),与年龄、透析龄、FGF23水平、血清钙、血清磷、iPTH无明显相关性。(8)多元有序logistic回归分析,年龄、透析龄是MHD患者骨代谢紊乱独立危险因素(OR=1.115,OR=1.029,P=0.000),Klotho蛋白是其独立保护因素(OR=1.226,P=0.000)。Klotho G-395A位点GG基因型不是其独立保护因素。结论:(1)维持性血液透析患者并发骨量异常比例可能较高;(2)Klotho蛋白和FGF23可能参与MHD患者钙磷代谢调节;(3)高Klotho蛋白水平是MHD患者合并骨代谢紊乱的独立保护因素,年龄和透析龄可能是其独立危险因素。Klotho G-395A位点GG基因型不是其独立保护因素。
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