论文部分内容阅读
目的:检测甲状腺癌患者外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs),探讨其临床意义。方法:收集28例甲状腺癌患者、5例良性甲状腺结节患者外周血,通过直径8μm的纳米孔膜过滤分离出外周血中的肿瘤细胞,建立特异性核酸探针组合,包括上皮标记物细胞粘附分子(EpCAM)、角蛋白(CK8、18、19)的转录RNA探针及间质特异性蛋白波形蛋白(Vimentin)、扭曲蛋白(Twist)转录RNA探针,运用多重RNA荧光原位杂交技术(RNA-ISH)基于上皮和间质转录RNA的表达情况来标记及鉴定CTC(上皮型CTC、间质型CTC、混合型CTC),并分别进行计数。结果:甲状腺癌患者28例,其中27例患者外周血检测出CTCs,1例未检出CTC(CTCs阳性率96.4%),CTCs数量波动在3-36个/5ml血,其中混合型CTC数量最多(占总CTCs 68.2%)。对照组为5例良性结节患者,其中4例检测出CTCs,不过细胞数量稀少,CTCs≤2个/5ml血。CTCs水平与患者的年龄、性别无关(p均>0.05)。伴淋巴结转移的甲状腺癌患者总CTCs、混合型CTC及间质型CTC水平较无淋巴结转移的甲状腺癌患者高(p<0.01),并且在已发生淋巴结转移的甲状腺癌患者组中间质型CTC检出率高于无淋巴结转移患者组(p<0.01)。CTCs水平与癌灶大小有关,乳头状癌患者(癌灶≥1cm)总CTCs、混合型CTC水平高于微小癌患者(癌灶<1cm),差异有统计学意义(p<0.05)。CTCs数量与癌灶边界是否清晰、结节血流信号是否丰富、有无微小钙化等恶性超声信号无关(p均>0.05)。结论:1、CTC技术可术前辅助判断可疑甲状腺结节的良恶性,甲状腺结节患者外周血CTCs>2个/5ml血提示结节恶性可能大。2、CTCs水平与患者的性别、年龄及甲状腺超声检测的多项恶性征象指标无关,但与甲状腺癌癌灶的大小、有无发生淋巴结转移等临床病理特征相关,癌灶越大CTCs数量越多,已出现淋巴结转移的甲状腺癌CTCs水平越高。3、在甲状腺癌中应用间质肿瘤细胞特异蛋白转录RNA指针(Vimentin和Twist)帮助分离出了上皮型及混合型CTC,还检测出了部分间质型CTCs,不仅增加了 CTCs检出的数量,还证实了甲状腺癌中上皮间质转化(EMT)现象的活跃性;我们的结论还提示间质型CTC与甲状腺癌淋巴结转移之间存在密切的关联。