论文部分内容阅读
目的:Ib型肝细胞生长因子受体抑制剂苯扎米特与顺铂联用对头颈部鳞状细胞癌的体外实验研究。 方法:通过对癌症基因组图谱(TCGA)数据库中头颈部鳞状细胞癌数据的处理,做出Met基因表达与头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)预后的相关性;采用CellCounting Kit-8(CCK-8)法研究苯扎米特及顺铂单独作用于HN30头颈部鳞状细胞癌细胞的细胞毒性,检测苯扎米特联合顺铂处理HN30头颈部鳞状细胞癌细胞后细胞的存活率;western blot法检测经联合处理后细胞DNA损伤能力的变化和c-Met下游PI3K/Akt信号通路的改变;流式细胞术检测经联合处理后细胞凋亡能力的变化。 结果:HN30头颈部鳞状细胞癌细胞的顺铂IC50=1.597μmol/L;苯扎米特的IC50=6.14μmol/mL;应用6μmol/mL苯扎米特联合1.6μmol/L顺铂与HN30头颈部鳞状细胞癌细胞株共培养,作用时间以24h最佳,24h组的HN30头颈部鳞状细胞癌细胞存活率(56.27±1.36)%与对照组HN30头颈部鳞状细胞癌细胞存活率(97.21±2.59)%相比,差异有统计学意义(P<0.05);细胞DNA损伤程度增强,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);met-KD组细胞和苯扎米特抑制组细胞都可通过抑制c-Met的表达调控PI3K/Akt1,p-c-Met、p-Akt1的表达量均有下降;苯扎米特与顺铂联合处理HN30头颈部鳞状细胞癌细胞后,p-c-Met、p-PI3K、p-AKt1与其他药物单独处理组比较均有下降;苯扎米特与顺铂联合处理HN30头颈部鳞状细胞癌细胞后,使用流式细胞术检测细胞凋亡,AnnexinⅤ/PE法分析空白对照组HN30细胞凋亡率为(3.75±1.43)%,苯扎米特组细胞凋亡率是(16.72±2.74)%,顺铂组细胞凋亡率是(35.43±8.51)%,联合组凋亡率为(57.31±10.83)%,差异有统计学意义(P<0.05)。 结论:在头颈部鳞状细胞癌中,Met基因的表达跟患者生存率存在一定相关性,Met基因的表达与患者总生存率呈负相关。Met小分子抑制剂苯扎米特可通过特异性抑制HN30头颈部鳞状细胞癌细胞c-Met的表达调控下游PI3K/AKT信号通路,p-c-Met、p-PI3k及p-AKT的表达量均下降,苯扎米特可通过抑制c-Met蛋白磷酸化来调控下游PI3K/AKT信号通路,抑制HN30头颈部鳞状细胞癌细胞的增殖。Met小分子抑制剂苯扎米特可通过抑制c-Met蛋白磷酸化来影响γH2AX表达水平,来调整HN30头颈部鳞状细胞癌细胞的DNA自我修复机制。苯扎米特与顺铂联合处理HN30头颈部鳞状细胞癌细胞后,促进HN30头颈部鳞状细胞癌细胞凋亡,提高肿瘤对顺铂化疗药物的敏感性。苯扎米特可能是头颈部鳞状细胞癌未来潜在的靶点药物,有望为头颈部鳞状细胞癌的化学治疗带来新的前景。