植烟黄壤中氮代谢优势细菌的筛选及复合菌剂应用效果研究

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1.对土壤中氮素进行调控,必须首先了解氮转化细菌在氮素分解过程中的作用、特性及彼此间的相互影响。本试验在烤烟主要生育期内,采集4种类型有机肥处理下烟株根区土壤,对其养分含量、氮素转化功能微生物数量、氨化作用强度、硝化作用强度以及脲酶活性进行了研究,结果表明油枯处理植烟土壤速效养分含量、酶活性等指标均在烤烟旺长期较高,创造了一个更有利于土壤养分矿化的微生态环境;在烤烟成熟期,油枯及秸秆处理养分含量较其他处理高,不利于烤烟落黄。通过对烤烟生育期土壤生物活性变化情况分析表明,亚硝化菌、好氧性自生固氮菌数量在70d达最大值,除单施化肥处理,配施有机肥各处理的氨化菌数量在70d达最大值。土壤有机质及氮素含量与氮转化菌存在较好的正相关性,其中氨化菌尤其显著,氨化细菌群在有机肥的氮素分解过程中影响较大,亚硝化菌在有机肥有机态氮分解过程中作用也明显。2.为了加速有机肥中有机氮的分解,需要加入氮素分解活性较强的菌剂,氨化细菌、亚硝化细菌分解氮素的效果尤其显著。采用菌种分离纯化的方法,用氨化菌、亚硝化菌分离培养基从4种不同类型有机肥处理中分离筛选优势细菌群,分析发现大多数优势菌株均是从有机肥处理中分离出来的,通过对菌株液体培养取样测定,氨化作用优势菌株为Naxibacter sp.、Massilia brevitalea、Stenotrophomonas rhizophila、Bacillus pumilus、Burkholderia cepacia;通过显色反应、菌种活性测定以及16s-DNA-PCR生理生化鉴定的方法,最终确定应用于配制复合微生物菌剂的菌株编号分别为A1、A2、A3、A4、A5、Y1、Y2、Y3、Y4,共9种。配制好的复合微生物菌剂符合菌肥质量的国家标准《微生物肥料NY227-94》。3.为了明确植烟土壤施用不同有机肥后复合微生物菌剂的添加量,通过室内试验新鲜的玉米秸秆、鸡粪堆腐过程中的有效态氮素含量的变化趋势可以初步确定。整个堆肥期间,秸秆无机态氮素呈增加的趋势,鸡粪铵态氮呈增加的趋势,硝态氮呈降低趋势。添加复合微生物菌剂可以减少铵态氮和硝态氮的损失。鸡粪处理组,不添加菌剂铵态氮含量增加幅度最小,第30d比第5d增加19.3%;硝态氮含量降低幅度最大的亦是鸡粪堆腐不添加菌剂处理,30d比5d硝态氮含量低43.34%。根据铵态氮含量变化可知,鸡粪、秸秆有机肥堆腐接种量为1%,堆肥结束时铵态氮含量最高;根据硝态氮含量变化可知,秸秆堆肥接种量为0.5%、鸡粪堆肥接种量为1%时,堆肥结束时硝态氮含量最高。所以最终确定大田试验添加菌剂量为施用有机肥质量的1%。4.为使有机肥处理的植烟土壤在烤烟生长旺长期保持较高的有效态氮素含量,烤烟生长成熟期保持较低的有机质、氮素含量,使烤烟按时落黄,需要通过施用氮素分解菌剂调节有机氮素分解的速度及过程。通过大田试验验证了氮素转化复合功能菌剂不同添加时期的应用效果,通过对烤烟生育期植烟土壤各指标的分析,结果表明添加菌剂有利于烤烟成熟期土壤中全氮的分解,有利于烤烟生长旺长期时土壤无机态氮素的增加,使烤烟成熟期土壤中氮素及有机质含量保持较低水平,与对照相比秸秆、鸡粪处理组130d时,50d添加菌剂处理较未添加菌剂处理有机质含量分别低10.60%、20.26%,全氮含量分别低5.24%、10.14%。秸秆、秸秆鸡粪、鸡粪处理组中,50d添加菌剂处理有机质降幅最大,130d比0d有机质含量分别低32.05%、31.36%、27.80%。添加的复合微生物菌剂使秸秆处理中土壤氮释放提前,解决了秸秆处理分解慢的问题,其氮碱比、糖碱比、糖氮比也均在生产优质烤烟的范围内。微生物菌剂施入后需要一定时间的恢复适应期,为了使有机质在旺长期分解加速,需要将菌剂在烤烟移栽后10~30天施入效果较好。
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