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目的:探讨无呼吸机辅助下正中开胸表面结扎兔冠状动脉左室支建立心梗模型成功率及二次开胸可行性;观察间充质干细胞(MSCs)心脏表面注射移植治疗兔心肌梗死(MI)的效果。方法:1、建立兔心肌梗死模型:15只成年日本大耳白兔,均在无呼吸机辅助下正中开胸表面结扎冠状动脉左室支建立心肌梗死模型,以术中肉眼观变化、建模前后心电图结合心脏彩超左室缩短分数(LVFS)减少值>5%作为建模成功标准,辅以组织病理学检测,观察建模效果;建模后4周末行二次开胸,根据其存活情况判断是否可行。而后,应用该方法制作20只兔模型备用。2、将20只兔随机均分为两组:移植组和对照组。酶消化法分离人脐带MSCs,扩增培养后调节浓度为5×106/0.4mL悬液。于兔建模后4周二次开胸时,移植组心脏表面4点注射MSCs悬液共0.4mL,对照组心脏表面4点注射温生理盐水共0.4mL。细胞移植后4周观察心脏彩超LVFS和血流动力学指标,以及病理学改变。结果:1、结扎兔冠状动脉左室支建立MI模型,共成功12只,二次开胸后共存活8只,存活率67%(8/12)。与建模前相比,建模后兔心电图出现典型动态变化,LVEDD和LVESD增大,LVFS明显降低(P<0.05)。二次开胸后心室内径变化与建模前、建模后均无明显差别(P>0.05),但LVFS与建模前差异仍有统计学意义(P<0.05);组织病理学HE染色和Masson三色染色显示,与正常部位心肌组织相比,梗死区及周边组织心肌纤维排列紊乱、断裂或肥大,部分心肌细胞丢失、呈空泡变性,间质水肿,可见少量炎性细胞浸润。2、分离培养的脐带MSCs显示呈梭形贴壁生长,高表达CD105和CD90,大多数不表达CD34和CD45。细胞移植疗效:与对照组相比,移植组LVFS明显升高(P<0.05),LVSP、LVEDP和-dp/dt max均有明显变化(P<0.05)。组织病理学HE染色和Masson三色染色显示移植组梗死区与正常区交界处存活细胞增多,且梗死区外侧可见大量红细胞聚集。结论:1、无呼吸机辅助下正中开胸表面结扎兔冠状动脉左室支可成功建立心肌梗死(MI)模型,且于建模后4周行二次开胸方法可行,可以用于MSCs移植研究。2、通过心脏表面注射MSCs能在一定程度上改善MI兔的心脏射血能力和运动功能,这可能与MSCs移植后促进新生血管形成,改善局部供血,通过旁分泌机制挽救濒死细胞或直接分化为心肌细胞有关,其作用机制有待进一步研究。