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目的:探讨复方接骨片对异体肌腱重建兔前交叉韧带腱-骨界面愈合的影响,观察并分析复方接骨片可能的作用机制。材料与方法:本次实验选用36只日本大耳白兔,另选10只作为肌腱供体兔,根据随机数字表法选出9只作为D-d组(假手术组),其余27只兔均由同一术者对其施行前交叉韧带离断术,并以处理好的异体半腱肌对其行改良前交叉韧带重建术,术后待兔麻醉完全苏醒后,给予兔a、b、c三种药物灌胃,a、b、c三种药物均由第三名与本实验无关人员进行配置,以便实施双盲,同时分至A、B、C三组,以A-a组、B-b组、C-c组进行标注,分笼饲养,于灌胃后4、8、12周随机选取每组3只兔进行分批处死,采取兔静脉血进行PINP、TRACP-5b、C-RP、全血白细胞计数检测;取兔膝关节标本通过Micro-CT观察骨隧道扩大率,生物力学检测移植后韧带极限抗拉负荷,分装标本进行HE、Masson组织学染色,比较各组各时间点腱-骨隧道愈合情况。结果:1.大体观察本研究采用析因设计方法对每组观察例数减少到最小,节省样本量,虽然在造模后共计有3只兔死亡,但不影响析因设计的分析结果,从整体上看,各组随着4周、8周、12周时间的延长,术后Lachman、前抽屉实验均有不同程度的改善;2.血液指标(详见表4、5、6、7)在第4周,复方接骨片组PINP、TRACP-5b、C-RP、全血白细胞计数的相对表达量为(64.38±0.57ng/ml、8.95±1.01ng/ml、30.01±4.43ug/ml、9.75±0.22*10^9/L),骨肽片组(66.92±0.25ng/ml、8.56±0.44ng/ml、31.04±1.40ug/ml、11.52±0.76*10^9/L),安慰剂组(66.92±0.25ng/ml、8.48±0.25ng/ml、25.87±2.10ug/ml、13.19±1.16*10^9/L),假手术组(62.01±0.68ng/ml、10.05±0.28ng/ml、27.11±2.00ug/ml、11.15±0.28*10^9/L),各项指标相对表达量组间相比(F=6.08,p=0.004<0.01;F=2.70,p=0.07>0.05;F=2.63,p=0.076>0.05;F=14.13,p=0.000<0.01)在第8周,复方接骨片组PINP、TRACP-5b、C-RP、全血白细胞计数的相对表达量为(95.23±2.26ng/ml、10.07±0.19ng/ml、40.07±1.97ug/ml、7.67±1.13*10^9/L),骨肽片组(89.94±0.48ng/ml、13.13±0.76ng/ml、37.75±1.68ug/ml、8.94±0.47*10^9/L),安慰剂组(76.30±3.14ng/ml、12.76±0.56ng/ml、40.24±1.25ug/ml、12.21±0.49*10^9/L),假手术组(63.73±1.10ng/ml、10.48±0.79ng/ml、37.25±1.50ug/ml、8.52±0.45*10^9/L),各项指标相对表达量组间相比(F=252.55,p=0.000<0.01;F=12.62,p=0.000>0.05;F=1.108,p=0.379>0.05;F=48.269,p=0.000<0.01)在第12周,复方接骨片组PINP、TRACP-5b、C-RP、全血白细胞计数的相对表达量为(73.16±0.93ng/ml、9.84±2.02ng/ml、21.47±1.28ug/ml、4.36±0.38*10^9/L),骨肽片组(67.78±0.78ng/ml、10.79±0.04ng/ml、23.01±3.19ug/ml、4.49±0.09*10^9/L),安慰剂组(69.82±0.70ng/ml、10.47±0.27ng/ml、27.21±5.32ug/ml、8.15±0.77*10^9/L),假手术组(62.99±1.46ng/ml、10.59±1.02ng/ml、25.66±3.26ug/ml、4.42±0.25*10^9/L),各项指标相对表达量组间相比(F=17.88,p=0.000<0.01;F=0.73,p=0.546>0.05;F=2.080,p=0.134>0.05;F=16.883,p=0.000<0.01)。3.影像学及生物力学(详见表8、9)通过Micro-CT检测结果显示,各组骨隧道直径均经历先扩大后缩小的过程,通过计算骨隧道扩大率比较各组差异,其中复方接骨片组在4、8、12周与其他组相比骨隧道扩大率最小,与其余两组相比F值分别为42.82、16.71、13.34,差异具有统计学意义;通过万能拉力仪器检测各组韧带极限抗拉负荷显示,随时间延长,各组移植后韧带抗拉力负荷均具有增加,在第12周可达到正常韧带极限抗拉水平,各组在4、8、12周相比F值分别为31.36、15.12、11.52,差异具有统计学意义。4.组织形态学观察(详见附图7、8)通过HE、Masson染色显示,各组在4、8、12周时,腱-骨界面均经历着组织坏死-重塑的过程,由于本次实验为腱-骨交界处横切面,不能完整看到肌腱走形,但观察腱骨界面细胞数目增殖可对腱-骨愈合水平进行判断,4周时,各组腱-骨界面炎性细胞增殖较为明显,骨细胞增殖密度较低,细胞排列(纤维走形)不规则,腱-骨界面处有空白存在,可散在胶原纤维生成;8周时,各组腱-骨界面骨细胞增殖密度增高,细胞排列趋向规则,腱-骨界面处空白区减少,可见胶原纤维生成较多,复方接骨片组最明显,Sharpey样结构初步形成;12周时,各组腱-骨界面细胞产生有交融现象,可见Sharpey样结构明显,细胞排列规则,腱-骨交界处胶原纤维生成明显增多,复方接骨片组结果优于其余两组。结论:1.复方接骨片和骨肽片均可促进血液中PINP含量增加,促进骨质生成;同时复方接骨片还能减少第8周血液中TRACP-5b含量,减少骨质破坏,从总体上看,复方接骨片效果更为稳定。2.前交叉韧带重建术后应用复方接骨片能减小兔重建术后骨隧道扩大率,使腱-骨界面交杂紧密、牢固,从而增加移植肌腱的极限抗拉力负荷。3.复方接骨片可促进骨细胞生成,促使腱-骨界面Sharpey样纤维形成来推进腱-骨愈合。