铜是在动物所有器官和细胞中发现的一种重要的微量元素,并发挥着重要的生物学功能。铜过载会引起肝细胞毒性,原因可能是其氧化还原性质以及参与Haber-Weiss反应而产生大量的活性氧（ROS）。ROS可引起核酸和蛋白质变性、多糖降解以及脂质过氧化、对细胞造成一系列的损伤。有研究表明ROS可通过引起细胞内的DNA、脂质和蛋白质等成分氧化损伤或直接作为信号分子诱导细胞自噬。为研究抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对高铜诱导鸡肝细胞氧化应激和自噬的影响,本试验以体外培养的鸡胚原代肝细胞为模型,应用含不同浓度铜离子（10μM、50μM、100μM）和NAC（1 mM）的细胞培养液孵育肝细胞,并于不同时间点收集细胞,利用CCK-8测定细胞活性;然后将细胞分为对照组、高铜组(100μM Cu²⁺)、高铜+NAC组(100μM Cu²⁺+1 mM NAC)、NAC组（1 mM NAC）,孵育24 h后,测定其培养上清液中乳酸脱氢酶（LDH）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）的活性以及培养细胞中超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、还原性谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）含量与活性,流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）含量,利用荧光定量PCR技术检测细胞中自噬相关基因Beclin-1、ATG-5、LC3-I、LC3-II的mRNA表达情况,结果表明:（1）不同浓度的铜离子和NAC孵育肝细胞时,低铜组(10μM Cu²⁺)和1 mM NAC组细胞的活性曲线与对照组无显著差异（P>0.05）,而中铜组(50μM Cu²⁺)和高铜组(100μM Cu²⁺)的细胞在孵育24 h后增殖显著受到抑制（P<0.05）。高铜+NAC组的细胞在孵育24 h之内生长有下降趋势,但是24 h后其增殖抑制显著降低。（2）与对照组相比,高铜组细胞上清液中的LDH、AST、ALT含量都显著升高（P<0.05）,而高铜+NAC组与高铜组相比,这三种酶的活性显著降低（P<0.05）。（3）与对照组相比,高铜组细胞中SOD、CAT活性以及MDA、ROS含量显著上升,GSH含量显著下降,肝细胞发生氧化损伤。高铜+NAC组与高铜组相比,加入了NAC可以显著的抑制上述趋势（P<0.05）,减轻了高铜对肝细胞造成的氧化损伤。（4）高铜可以显著提高自噬相关基因Beclin-1、ATG-5、LC3-I、LC3-II的mRNA表达水平（P<0.05）,而加入NAC可以显著抑制这种升高趋势（P<0.05）。结论:由本试验可以得出,高铜可以造成鸡肝细胞氧化损伤,并诱导其细胞自噬相关基因mRNA表达水平升高;NAC可以保护鸡肝细胞抗氧化功能,降低其自噬相关基因mRNA的表达水平。