Part-Ⅰ含WD40保守域并导致脂肪体消融的家蚕BmPLA2的分子克隆、表达和体内干扰PLA2是参与水解花生四烯酸以及其他多种不饱和脂肪酸的超级酶家族中的一员,这些酶从sn-2位置释放出自由的花生四烯酸和一个溶血磷脂。目前对PLA2在脊椎动物上的研究主要是借助于细菌感染的炎症免疫应答反应。PLA2酶包含最大的磷脂酶类,参与体内脂质信号分子如花生四烯酸的体内释放。已有关于PLA2在免疫相关组织如血细胞和脂肪体上的活性研究。在本文中,我们克隆了家蚕脂肪体的PLA2相关基因,命名为BmPLA2。该基因全长1.031kb,编码37.64 kDa的蛋白质。生物信息学分析此蛋白质含有一个假想的WD40保守结构域,与Danaus plexippus同源。在我们所研究的家蚕组织中,BmPLA2在五龄第3天家蚕的脂肪体高表达,皮肤组织中低表达。我们还研究了BmPLA2在较早龄期幼虫中的差异表达,同时发现该基因雌蛹表达量高于雄蛹。RNAi介导的基因沉默结果显示干扰24h、48h、72h后BmPLA2表达量明显降低,同时观察到干扰后的幼虫和蛹表现出成虫致死和不发育。另外,我们还观察了经RNAi诱导后的幼虫脂肪体细胞的形态特征,为BmPLA2基因及其功能的进一步研究作了探讨。Part-Ⅱ C端具有GGT2结合位点的BmRab3在家蚕中部丝腺的高度表达酵母Ypt1和含有哺乳动物Rab （Ras相关蛋白发现与脑部）GTPase的Sec4蛋白被发现已有二十年,它们在进化上高度保守,并且是重要的膜运输调节因子。RabGTPase是被称为Ras GTPases超级家族的成员。目前,Ras家族中已有超过70个的Rab及Rab类似物被报道。很明显地,Rab GTPases作为一种分子开关,以活性和非活性两种状态循环,实际上起到了整合双层膜运输结构和细胞间信号传导的作用。虽然它们分子结构较小,但Rab GTPases具有多个互作位点,而且它们在功能和结构上的交互作用机制是非常重要的。此家族其中一个成员Rab3 GTPase在囊泡运输过程中起重要作用,除了在脂肪细胞、周缘组织和外分泌腺中的活性之外,其高表达于脑部及内分泌腺。有趣的是,像家蚕等鳞翅目昆虫丝腺在转化医学及其他研究中成为重要的研究材料。在丝蛋白的诸多机制尚不明确的情况下,本文通过荧光定量PCR方法,首次报道了BmRab3基因在家蚕中部丝腺的高表达。生物信息学分析,此基因的理论等电点5.52,蛋白分子量24.3 kDa. BmRab3含有C端GGT2结合位点,并包含两个推定的GEF/GDI作用位点。多重序列比对发现其与其他物种Rab3的高度相似性。进化树分析BmRab3位于T. castanium和A. aegypti之间。除其他的家蚕组织以外,我们还分别测得了该基因在中部丝腺,后部丝腺以及整个的丝腺中表达了BmRab3基因。结果显示,BmRab3在中部丝腺的表达高于后部丝腺和整个丝腺组织。此外,BmRab3在早期家蚕幼虫的表达趋势不同,并且在雄蛹的表达量高于雌蛹。活体BmRab3 dsRNA干扰显示,中部丝腺中BmRab3的基因抑制在注射后24h高于72h。基因沉默同时会导致幼虫的发育停止及蛹的死亡。