【摘 要】
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目的:观察白藜芦醇(Resveratrol,RSV)、H2O2和氧化三甲胺(Trimethylamine-N-oxide,TMAO)干预对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老的影响,探讨R
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目的:观察白藜芦醇(Resveratrol,RSV)、H2O2和氧化三甲胺(Trimethylamine-N-oxide,TMAO)干预对人脐静脉内皮细胞(Human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)衰老的影响,探讨RSV是否能减轻HUEVCs衰老及其可能机制。方法:传代培养HUVECs,按干预的因素分为对照组、H2O2组、TMAO组、RSV组、H2O2+TMAO组和RSV+H2O2+TMAO组,干预时间为72 h,其中RSV提前12 h干预,用SA-β-Gal染色法检测各组细胞衰老变化和Western Blot检测各组细胞衰老相关蛋白p53、PAI-1和p21及相关通路蛋白AMPK、p-AMPK、SIRT1、FOXO1和eNOS表达。结果:(1)H2O2组SA-β-Gal阳性率及细胞衰老相关蛋白p53、PAI-1和p21表达分别高于对照组、TMAO组和RSV组(p均<0.05),TMAO组和RSV组上述指标无明显变化(p均>0.05),而H2O2+TMAO组上述指标分别明显高于对照组、H2O2组、TMAO组和RSV组(p均<0.05)。(2)RSV+H2O2+TMAO组SA-β-Gal阳性率及细胞衰老相关蛋白p53、PAI-1和p21表达分别低于H2O2+TMAO组(p均<0.05)。(3)H2O2组、TMAO组和H2O2+TMAO组p-AMPK、SIRT1、FOXO1和eNOS蛋白表达均低于对照组,以H2O2+TMAO组最明显(p均<0.01),RSV组上述蛋白表达均高于对照组(p均<0.05),RSV+H2O2+TMAO组明显高于H2O2+TMAO组(p均<0.05);AMPK蛋白表达在各组间无显著性差异(p>0.05)。结论:TMAO单独作用于HUVECs 72 h不引起细胞衰老,但可增加H2O2诱导的HUVECs衰老;RSV能减轻H2O2联合TMAO诱导的HUEVCs衰老,其机制可能与激活AMPK/SIRT1/FOXO1信号通路及上调eNOS有关。
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