【摘 要】
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目的:探讨慢性宫内缺氧造成子代鼠宫内生长受限（fetal growth restriction,FGR）及其对子代雌鼠出生后不同发育阶段卵巢储备功能的影响;分析慢性宫内缺氧组和常氧对照组子代雌鼠卵巢组织中miRNA表达谱的差异,以期发现慢性宫内缺氧致子代雌鼠卵巢储备功能改变相关的特征性miRNA,并初步探讨差异miRNA对子代雌鼠卵巢储备功能所涉及的可能调控机制。方法:健康雌性SD大鼠（20只）经
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目的:探讨慢性宫内缺氧造成子代鼠宫内生长受限（fetal growth restriction,FGR）及其对子代雌鼠出生后不同发育阶段卵巢储备功能的影响;分析慢性宫内缺氧组和常氧对照组子代雌鼠卵巢组织中miRNA表达谱的差异,以期发现慢性宫内缺氧致子代雌鼠卵巢储备功能改变相关的特征性miRNA,并初步探讨差异miRNA对子代雌鼠卵巢储备功能所涉及的可能调控机制。方法:健康雌性SD大鼠（20只）经正常交配受孕,于妊娠第3天（gestation day 3,GD3）随机分为两组:慢性宫内缺氧组（简称缺氧组,12只）及常氧对照组（简称对照组,8只）。缺氧组大鼠于妊娠第4～21天（GD4～21）行慢性宫内缺氧处理。第一次缺氧处理后（缺氧4小时）,每组随机选取4只孕鼠行动脉血气分析检测。测量子代雌鼠（出生后第5天,20天,40天）体重、卵巢重量等生物生长参数;检测血清生化指标:抗苗勒管激素（AMH）;分别对子代雌鼠（出生后第5天,20天,40天）的卵巢行HE染色并进行组织形态学观察和卵泡计数。通过数字化基因表达谱技术,筛选缺氧组和对照组的差异表达miRNA。结果:1、缺氧组大鼠于缺氧第一天（缺氧4h后）,与对照组相比,缺氧组大鼠动脉血PaO2、SaO2均明显降低（P均<0.05）。2、慢性宫内缺氧可导致胎儿宫内生长受限,出生体重下降（P<0.05）;出生后第5天,缺氧组子代雌鼠体重为（9.00±1.48）g,比对照组的（12.14±1.41）g明显减少（P<0.05）;出生后第20天,缺氧组子代雌鼠体重为（49.66±12.50）g,与常氧对照组的（50.6±10.05）g相近（P<0.05）,子代鼠出现“追赶生长”现象。3、相较于对照组,出生后第5天、20天及40天缺氧组子代雌鼠总卵泡数及原始卵泡数均下降（P<0.05）。出生后第5天缺氧组子代雌鼠原始卵泡的数量比对照组子代低27.1%（对照组4771±474 vs缺氧组3477±358,t=6.882,P<0.001）;出生后第20天低40.0%（对照组2857±405 vs缺氧组1714±323,t值=6.978,P<0.001）;出生后第40天低41.6%（对照组1678±214 vs缺氧组980±216,t=7.257,P<0.001）。4、慢性宫内缺氧可对子代卵巢组织miRNA表达进行程序性调控,差异miRNA共11个,其中5个上调,6个下调,基因功能涉及细胞增生、调节、凋亡及卵巢血管化。结论:1、慢性宫内缺氧使子代雌鼠卵巢储备功能下降。2、慢性宫内缺氧可程序性调控子代雌鼠卵巢miRNA差异表达,与细胞增生、调节、凋亡及血管化功能有关,这可能是慢性宫内缺氧引起卵巢储备功能下降发生发展的机制。
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