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肝癌是世界范围内最常见的恶性肿瘤之一，发病率呈逐渐上升趋势，死亡率亦居高不下，严重危害人类健康，目前缺乏有效的治疗措施。肝癌对化疗不敏感，有效率不超过20%；靶向药物如索拉非尼的问世也未能明显改善肝癌的治疗现状。在探讨抗肝癌药物历程中，华蟾素注射液以其多靶位的抗肝癌机制及显著的免疫提升功能，受到前所未有的关注，抗肝癌机制正在探讨中。DNA拓扑异构酶Ⅱ(Topoisomerase,TopoⅡ)在DNA复制，转录及重组过程中起重要作用，是抗癌药物的重要靶点，有关华蟾素注射液对TopoⅡ的影响，目前尚未见报道。目的：本研究通过华蟾素注射液作用人肝癌HepG-2细胞，观察其对细胞增殖及TopoⅡ表达的影响，探讨华蟾素注射液抗肝癌作用的药效机制，为临床华蟾素注射液治疗肝癌提供理论和实验依据，为世界贡献机制明确的具有中国产权的抗肝癌药物。方法：1.不同浓度华蟾素注射液分别作用HepG-2细胞12h、24h和48h，采用CCK-8实验技术观察华蟾素注射液对HepG-2细胞增殖的影响。2.不同浓度华蟾素注射液分别作用HepG-2细胞24h和48h，采用流式细胞术观察华蟾素注射液对HepG-2细胞凋亡的影响。3.不同浓度华蟾素注射液作用HepG-2细胞24h，采用流式细胞术分析华蟾素注射液对HepG-2细胞周期分布的影响。4.不同浓度华蟾素注射液分别作用HepG-2细胞48h，采用RT-PCR实验技术检测华蟾素注射液对HepG-2细胞TopoⅡmRNA表达的影响。5.不同浓度华蟾素注射液分别作用HepG-2细胞24h，采用Western blot实验技术检测华蟾素注射液对HepG-2细胞TopoⅡ蛋白表达的影响。结果：1.CCK-8细胞增殖实验结果显示：华蟾素注射液能够抑制HepG-2细胞增殖，抑制率随着药物浓度的升高和时间的延长逐渐增加。2.流式细胞术结果显示：华蟾素注射液能够诱导HepG-2细胞凋亡，凋亡率随着药物浓度的升高和时间的延长逐渐增加。3.流式细胞术结果显示：随着华蟾素注射液药物浓度增高，G0/G1及S期HepG-2细胞比例增高，与对照组比较，差异具有显著性(P<0.05)。4.RT-PCR实验结果显示：华蟾素注射液能够抑制HepG-2细胞TopoⅡmRNA表达，随着药物浓度的增高，TopoⅡmRNA表达逐渐降低。5.Western blot实验结果显示：华蟾素注射液能够下调HepG-2细胞TopoⅡ蛋白表达，随着药物浓度的增高，TopoⅡ蛋白表达逐渐降低。结论：华蟾素注射液能够明显抑制HepG-2细胞增殖，呈时间与剂量依赖性；促进细胞凋亡，呈时间与剂量依赖性；阻滞肿瘤细胞周期于S期；下调TopoⅡ的表达可能是华蟾素注射液的药效机制之一，华蟾素注射液是有前途的抗肝癌药物。