论文部分内容阅读
二十多年来,用转基因动物生产药物蛋白已经取得了突破性进展,具有广阔的应用前景。与哺乳动物相比,禽类具有个体小,繁殖率高,世代间隔短,蛋中可以获得目的基因产物等优势。但是由于禽类的独特的生殖生理特点,鸡输卵管生物反应器的开发相对落后。本研究首先构建了鸡输卵管组织特异性基因打靶载体和分泌型融合表达载体,将后者转染鸡法氏囊淋巴细胞(DT40)系,筛选得到了可稳定表达并分泌人Leptin和GFP的细胞,为转基因鸡的研究和输卵管生物反应器的制备奠定了基础。同时,为了解决外源基因产物引起宿主免疫应答的问题,本文通过在鸡胚发育早期的不同阶段,采用胚胎血管微注射和卵黄注射两种方式,将外源蛋白抗原引入鸡胚,诱导了出生后小鸡对同种抗原的免疫耐受,获得了完全免疫耐受和部分免疫耐受的个体。结果表明,构建的卵清蛋白基因打靶载体和分泌型融合表达载体为转基因鸡的研究提供了上游元件;可稳定表达并分泌人Leptin和GFP的细胞系,为利用鸡核移植法和嵌合体法制备输卵管生物反应器奠定了基础;诱导鸡免疫耐受模型的初步建立,为解决转基因产物引起的免疫应答问题,高效获得目的基因产物提供了新的方法和新的思路。