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本文主要就不同分割液、培养液、分割处理方法及不同的冷冻保护液和的冷冻处理方法对小鼠桑椹胚和囊胚的影响进行了系统的研究。结果如下:1首先研究了不同的分割液和不同胚胎发育阶段对分割效果的影响,发现在12.5%蔗糖分割液中分割桑椹胚时,分割成功率显著高于m-PBS处理组(60.83% vs 51.67%,P<0.05 ),而分割囊胚时两分割液之间无显著性差异(P >0.05 );在m-PBS中分割囊胚和桑椹胚,其成功率前者显著高于后者(70.37%vs 51.67%,P<0.01),但是在12.5%蔗糖分割液中分别对囊胚和桑椹胚进行分割时,两者无显著性差异(P>0.05)。2无论是桑椹胚还是囊胚,其半胚经不同培养液m-PBS和TCM-199-Hepes培养后存活率差异均不显著(62.50% vs 63.64%;80.36% vs 82.76%,P>0.05);桑椹胚和囊胚分割后的半胚经m-PBS培养液培养后,所得半胚存活率两者间差异显著(62.50% vs 80.36%,P<0.05),经TCM-199-Hepes培养液培养后,所得半胚存活率两者间差异显著(63.64% vs 82.76%,P<0.05)。3桑椹胚去致密化后,其分割成功率显著高于未处理组(73.08% vs 51.92%,P<0.01),半胚培养后的囊胚发育率也显著高于未处理组(71.15% vs 46.15%,P<0.01)。4半胚经琼脂包埋后,利用VSⅠ和VSⅡ冷冻液进行OPS法玻璃化冷冻,解冻后其存活率均显著高于未处理组(90.16% vs48.28%;88.52% vs 44.83%,P<0.01),培养48h后的半胚发育率,处理组也均显著高于未处理组(61.82% vs 25.86%;61.11% vs 24.13%,P<0.01)。琼脂包埋组解冻后的半胚存活数和发育率,VSⅠ和VSⅡ之间差异均不显著(90.16% vs 88.52%;61.82% vs 61.11%,P>0.05);未包埋组解冻后VSⅠ和VSⅡ之间差异也均不显著(48.28% vs 44.83%;25.86% vs 24.13%,P>0.05)。5桑椹胚和囊胚分别经两种不同保护液(VSⅠ和VSⅡ)冷冻后形态良好率差异均不显著(96.94% vs 95.96%;86.87% vs 84.38%,P>0.05);经VSⅠ保护液冷冻后,桑椹胚和囊胚之间形态良好率差异非常显著(96.94% vs 86.87%,P<0.01),经VSⅡ保护液冷冻后,两者之间形态良好率差异也极显著(95.96% vs 84.38%,P<0.01)。6小鼠胚胎经分割后冷冻,其平均存活率为40.48%,经冷冻后分割的平均存活率为81.63%,两者之间差异非常显著(P<0.01)。