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药对是指两味药的配伍应用,是历代医家经过临床验证,把配伍后疗效更佳的药物固定下来而形成的,是中药配伍中最小的固定单位。黄芩、黄连伍用,出自《伤寒论》,是临床最为常用的清热解毒药对之一。中医认为,黄芩苦寒,善于清肺、大肠火热：黄连苦寒,善泻心火,除湿散郁。二药参合,清热燥湿,泻火解毒,效果益彰。1.黄芩-黄连药对主要成分体内分析方法的建立本研究建立了一种简单、快速、灵敏的LC-MS-MS方法同时测定大鼠血浆中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、小檗碱、巴马亭、药根碱的浓度,以淫羊藿苷(对黄酮类成分)、四氢巴马亭(对生物碱类成分)为内标,血浆样品加入0.1%NaH2PO4溶液后用乙腈沉淀蛋白,色谱柱为Agilent ZorbaxSB-C18(3.5μm,150x2.1mm,I.D.),流动相为乙睛-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱,流速0.25ml/min,柱温35℃。检测器为AgilentG6410A型串联质谱,采用MRM正离子模式检测。黄酮类成分(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素)的最低定量限为10 ng/ml,生物碱类成分(小檗碱、巴马亭、药根碱)的最低定量限为0.6ng/ml,日内和日间准确度、精密度良好。本法操作简单,选择性好,灵敏度高,适用于黄芩-黄连药对中主要成分的药代动力学研究。2.黄芩-黄连药对体内分析方法在大鼠体内复方制剂药代动力学研究中的应用采用本文建立的生物样品体内分析方法对复方制剂一清胶囊和葛根芩连丸在大鼠体内药代动力学进行研究。结果显示,本方法专属性强,灵敏度高,符合生物样品分析要求,可广泛应用于含黄芩-黄连药对的中药复方体内定量分析。3.黄芩、黄连单用及合用在大鼠体内药代动力学比较黄芩、黄连单用及合用实验结果显示,两药合用后黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、小檗碱、巴马亭的生物利用度均不同程度降低,进一步研究药对中主要成分黄芩苷、小檗碱单用及合用,发现合用后这2个成分的生物利用度均不同程度降低,与黄芩-黄连实验结果一致。表明,黄芩、黄连伍用生物利用度降低这一现象为药对中主要成分间相互作用产生。4.黄芩、黄连主要成分体外代谢相互作用的初步探索本文利用体外肝微粒体模型对黄芩、黄连主要成分在代谢方面相互作用进行初步探索。采用人肝微粒体体外温孵技术对黄芩-黄连药对中黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、小檗碱、巴马亭、药根碱、黄芩和黄连进行体外P450酶CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP2C19、CYP2E1、CYP1A2活性研究。结果表明,黄芩、黄连中某些成分具P450酶抑制或激动作用。基于黄芩、黄连单用及合用在大鼠体内药代动力学比较,小檗碱、巴马亭对CYP3A4的激动作用可能在药对体内相互过程中起作用,为此,进一步对黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素进行CYP3A4底物判定实验,但结果显示,它们均不是CYP3A4代谢。