论文部分内容阅读
寒冷是北方地区动物面临的主要应激源，研究表明冷应激可直接影响畜禽的健康及福利。当生物体暴露于各种应激条件下，大多数蛋白质的合成受阻，但其中一种高度保守的蛋白—热休克蛋白，它会快速合成以应对应激。本实验为探讨冷应激对雏鸡组织热休克蛋白及小肠免疫功能的影响，应用基因克隆技术在原核表达系统中表达了Hsp90、Hsp70和Hsp60基因并制备了多克隆抗体，以雏鸡为研究对象，进行急、慢性冷应激（12±1℃）处理。通过荧光定量PCR和Western blot技术检测雏鸡组织热休克蛋白及小肠免疫基因的表达。结果表明：1.利用原核表达载体表达Hsp90、Hsp70和Hsp60融合蛋白免疫新西兰白兔，成功制备了兔抗鸡Hsp90、Hsp70和Hsp60多克隆抗体。2.急、慢性冷应激时，各组织中的Hsp90、Hsp70、Hsp60、Hsp40和Hsp27表达量整体呈增加趋势，但是个别组织个别Hsps表达量降低，如急性冷应激时脾脏Hsp90、Hsp70和Hsp40表达降低，胸腺Hsp60和Hsp40表达降低；其中心脏Hsp90的表达量在急慢性冷应激时均降低。结果表明，在冷应激时Hsps在各器官组织中的表达水平不同，反映了Hsps在各器官组织中的不同调节作用。Hsp90可作为评价心肌损伤的生物学指标。3.急、慢性冷应激引起雏鸡小肠IgM、IgA、IgG、plgR、TGF-β4、IL-4和IL-10基因的mRNA表达水平发生改变。冷应激下小肠IgM、IgA、IgG、plgR和IL-4表达增加，尤其是plgR在十二指肠比空肠和回肠显著增加。此外，TGF-β4和IL-10的mRNA表达水平在急性和慢性冷应激有一个先上升后下降的趋势。结果表明，冷应激会引起鸡小肠免疫功能改变。综上所述，本研究表明了冷应激对雏鸡组织热休克蛋白及小肠免疫功能有一定影响。热休克蛋白在组织中整体表达上调，表明冷应激可致鸡组织损伤、免疫力下降。雏鸡可通过热休克蛋白调节组织相关功能，应对冷应激给机体造成的损害。本研究为探讨冷应激机制提供理论基础和实验依据。