稻瘟病菌Rho4及其假定GEF蛋白Bud3的功能分析

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稻瘟病菌是引起稻瘟病的一种丝状真菌,现在已经被当做研究植物致病真菌的一种模式生物。Rho蛋白属于Ras超家族中的亚家族之一,以GTP激活态和GDP失活态的循环开关形式,在细胞的形态建成以及囊泡运输方面具有重要的作用。鸟苷酸交换因子(GEF)可以通过将GDP转换为GTP,从而激活Rho蛋白。酿酒酵母中Bud3是Rho家族成员Rho4的一个GEF,具有保守的GEF结构域。目前稻瘟菌MoRho4(MGG_03901)及其假定GEF蛋白MoBud3(MGG_01695)的功能还不清楚。本研究通过基因敲除的方法获得了MoBud3的缺失突变体ΔMoBud3,并对此突变体和前人得到的MoRho4缺失突变体ΔMoRho4以及点突变转化子MoRho4-CA和MoRho4-DN的表型做了相关的分析。结果表明,和野生型菌株Ku80比较,ΔMoBud3的生长减慢,分生孢子的产量减少且形态畸形,附着胞的萌发率衰减,隔膜形成异常,致病性降低。ΔMoRho4,MoRho4-CA和MoRho4-DN在菌丝生长,隔膜和附着胞形成以及对水稻和大麦叶片的致病性等方面的表型与ΔMoBud3十分相似,其中ΔMoRho4和MoRho4-CA的气生菌丝出现了较多的分支。本研究表明,MoRho4和MoBud3在稻瘟病菌的营养生长和致病性方面具有重要的调节作用。
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