鱼腥草内生抑菌活性微生物的研究

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鱼腥草中的癸酰乙醛(俗称鱼腥草素)为抗菌的有效成分,对卡他球菌(Micrococcus catarrhalis)、溶血性链球菌(Streptococcus haemokytic)、流感杆菌(Haemophilus influenzae)、肺炎双球菌(Diplococcus pneumonia)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)有明显的抑制作用,对大肠杆菌(E.coli)、痢疾杆菌(shigella spp)及伤寒杆菌(Salmonella typhi)等也有抑制作用。大量研究表明内生菌往往能合成与寄主植物相似药理作用的物质。为了分离筛选能合成有重要药用价值物质的微生物,本人以鱼腥草内生微生物为研究对象,进行了分离筛选。对鱼腥草不同器官中内生菌的数量分布及细菌的一般特性进行了研究,结果表明:鱼腥草根、茎、叶中都存在大量内生菌,总的数量趋势是根(8.126×10~4cfu/gfw)大于茎(1.882×10~4cfu/gfw),茎大于叶(3.912×10~3cfu/gfw);同时各器官中细菌数(根为7.92×10~4cfu/gfw、茎为1.72×10~4cfu/gfw、叶为3.07×10~3cfu/gfw)大于放线菌数,放线菌数大于真菌数(叶中真菌数大于放线菌数);各器官中的内生细菌以革兰氏阳性芽孢杆菌为主,其中茎(革兰氏阳性菌占91.7%,芽孢菌占总菌数的83.3%,杆菌占总菌数的75.0%)表现最为明显。结合鱼腥草内生菌的总体特征,以茎内生细菌为筛选抗性菌的重点,先后从约200个细菌菌株筛得7株同时对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌都有较好抗性的菌株,其点接法抑菌圈内外径之比依次为:抑大肠杆菌:3.28、2.67、2、4、3、2、1.63;抑金黄色葡萄球菌:3.8、1.82、4、2.71、15、2、3.33;并作了初步鉴定,具体如下:芽孢杆菌属(Bacillus)5株、假单胞菌属(Pseudomonas)和弗拉德氏菌属(Frateuria)各1株。对这7株抗性菌株抗菌特性进行的初步研究表明,其发酵液经细菌过滤器(孔径0.22μm)过滤,滤纸片法测得其抑菌圈直径在10mm左右,故其抗菌特性由胞外分泌物质行使;这些抗菌物质具有较好的耐热性能,90℃水浴10min不失活:发酵液浓缩10倍后在蒸馏水中透析18h后,所有菌株发酵液均失去抑茵活性;不同菌株发酵液浓缩10倍并去除蛋白质后,以同操作培养基为参比液,所有菌株发酵液在200nm~800nm有最大吸收峰。其中1、2、3、7号菌发酵液在鱼腥草素最大吸收峰283nm处出现吸收峰,初步判定为鱼腥草素的同类化合物。
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