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本试验旨在研究丁酸梭菌及其磷壁酸对肠道细胞作用的分子机制。以人体结肠腺癌细胞HT-29细胞为试验对象,将其接种于六孔板上。TX-114法提取丁酸梭菌的磷壁酸,利用红外光谱(IR)及核磁共振氢谱(NMR)检测提取磷壁酸的纯度；分别用浓度为0,50μg/mL、80μg/mL的磷壁酸处理细胞24h后,加入FITC标记的浓度为109CFU/mL的丁酸梭菌,孵育2h后,于荧光倒置显微镜下观察细菌的粘附情况；分别用浓度为0、10CFU/mL、103CFU/mL、105CFU/mL、107CFU/mL、109CFU/mL的丁酸梭菌以及浓度为0.10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、80μg/mL、100μg/mL的磷壁酸处理HT-29细胞12h,Trizol法提取细胞总RNA,反转录得到cDNA,利用RT-PCR技术分析IL-6、IL-8、IL-10、Hsp、TNF-α、NF-κB等免疫因子的表达水平；分别用浓度为0、10CFU/mL、103CFU/mL、105CFU/mL、107CFU/mL、109CFU/mL的丁酸梭菌以及浓度为0、10μg/mL、20μg/mL、50μg/mL、80μg/mL、100/μg/mL的磷壁酸处理HT-29细胞24h,收集细胞培养液,用ELISA技术分析分泌到胞外的IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α等炎症因子的水平。试验结果：经红外光谱及核磁共振氢谱检测,用TX-114法提取的磷壁酸无核酸及蛋白质残留,含有特征基团,具有很好的纯度,可用于后续研究,分析其生物学功能。用磷壁酸及丁酸梭菌同时处理细胞时,随着磷壁酸处理浓度的增加,丁酸梭菌对HT-29细胞的粘附数量显著下降。随着丁酸梭菌及磷壁酸处理浓度的增加,促炎症因子IL-8的mRNA表达量增加,TNF-a的mRNA表达量下降,IL-6的mRNA表达量无变化；炎症抑制因子IL-10的mRNA表达量下降,Hsp70的mRNA表达量增加；信号通路蛋白NF-κB的mRNA表达量下降。细胞培养液中免疫因子IL-6、IL-10、IL-12、TNF-α的浓度太低,未能检测到。由以上的研究结果可以看出：用TX-114法可以提取到纯度较高的丁酸梭菌磷壁酸；且丁酸梭菌磷壁酸对丁酸梭菌的粘附具有重要作用,是丁酸梭菌重要的粘附成分；丁酸梭菌及其磷壁酸会引起HT-29细胞的炎症反应,但是也会通过增加炎症抑制因子的分泌来调节炎症反应,从而避免炎性因子的过度表达而损伤组织,这也体现了丁酸梭菌的益生特性。而促炎因子IL-8的表达量增加,可能是使寄主细胞处于对抗细菌感染的警戒状态。我们同时观察到,丁酸梭菌及其磷壁酸的作用趋势相同,可以做出初步推测,磷壁酸在丁酸梭菌的粘附定植及其免疫调节过程中发挥着重要的作用。这一推测还需要后续更加深入的研究进行验证。