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目的(1)建立检测外周血单个核细胞(PBMC)人类主要组织相容性抗原HLA-A,HLA-B,HLA-DP,HLA-DR和HLA-G的荧光定量逆转录聚合酶链反应的方法。(2)探讨胃癌患者外周血单个核细胞(PBMC)HLA-A,HLA-B,HLA-DP,HLA-DR,HLA-G基因mRNA的表达水平和细胞膜表面HLA-Ⅰ类分子和HLA-G分子蛋白表达水平,研究其与胃癌发生发展的关系和对胃癌的临床应用价值。方法设计HLA-A,HLA-B,HLA-DP,HLA-DR,HLA-G基因引物和实时荧光PCR相对定量法反应体系,在ABI7500实时荧光定量PCR仪上检测43例胃癌患者和22例健康人外周血单个核细胞内基因表达水平,以SPSS 10.0统计软件分析实验数据,探讨其差异。应用流式细胞术测定10例胃癌患者与5例健康人外周血单个核细胞表面的HLA-Ⅰ类分子和HLA-G分子表达,比较其差异。结果(1) 43例胃癌患者HLA-A,HLA-B,HLA-DP,HLA-DR,HLA-G的mRNA相对表达量分别为0.71±0.26,0.61±0.37,0.91±0.33,0.90±0.38,0.77±0.27。健康组分别为1.23±0.60,1.17±0.60,1.07±0.68,1.12±0.55,0.98±0.37。与健康组相比,胃癌患者HLA-A,HLA-B,HLA-G表达水平低于正常人,差异有统计学意义(P＜0.05)。HLA-DP和HLA-DR差异无统计学意义(P＞0.05)。(2)在胃癌患者组中,高+中分化组(8例)HLA-A,HLA-B,HLA-DP,HLA-DR和HLA-G的mRNA相对表达量分别为0.79±0.24、0.58±0.36、0.78±0.20、0.83±0.26、0.70±0.22,低分化组(35例)相对表达量分别为0.70±0.27、0.63±0.38、0.95±0.36、0.92±0.40、0.79±0.28,与高分化组差异无统计学意义(P＞0.05)。(3)在胃癌患者组中,Ⅰ期+Ⅱ期(12例)的HLA-A,HLA-B,HLA-DP,HLA-DR和HLA-G的mRNA相对表达量分别为0.73±0.32、0.59±0.43、0.84±0.39、0.83±0.32、0.99±0.22。Ⅲ期+Ⅳ期(31例)相对表达量分别为0.71±0.25、0.62±0.36、0.94±0.32、0.92±0.39、0.68±0.23。胃癌Ⅰ期+Ⅱ期的HLA-G相对表达量高于Ⅲ期+Ⅳ期,差异有统计学意义(P＜0.05)。不同分期的HLA-A、HLA-B、HLA-DR、HLA-DP的相对表达量差异无统计学意义(P＞0.05)。。(4)应用流式细胞术检测,10例胃癌患者外周血淋巴细胞HLA-Ⅰ类分子的平均荧光强度为390.1±72.8,5例健康人为552.6±68.8,差异有统计学意义(p＜0.05);表达率分别为94.2%和98.4%,差异无统计学意义(P＞0.05)。(5)应用流式细胞术检测,外周血淋巴细胞HLA-G分子主要表达在CD4~+CD8~-细胞上。(6)应用流式细胞术检测,10例胃癌患者外周血CD4~+淋巴细胞HLA-G分子的表达率(%)为0.48±0.12,5例健康人为0.69±0.16,胃癌患者组HLA-G分子表达率有下降倾向,但无统计学意义(P＞0.05)。结论(1)胃癌患者外周血单个核细胞的HLA-A,HLA-B,HLA-G的基因表达水平下调且HLA-G在不同分期间存在差异。(2)胃癌患者外周血T淋巴细胞的HLA-Ⅰ类分子和HLA-G分子的表达水平有下调倾向,HLA-G分子主要表达在CD4~+CD8~-细胞上。(3)检测胃癌患者外周血单个核细胞的HLA-A,HLA-B,HLA-G基因表达水平和淋巴细胞表面HLA-Ⅰ类分子和HLA-G分子有助于胃癌诊断和研究。