PRR11(Proline-rich protein11)是我们最近发现并鉴定的一个参与细胞周期调控和肺癌等肿瘤发生发展的新基因。Ska2(spindle andkinetochore associated complex subunit2)，又称FAM33A(family withsequence similarity33，member A)，也是新近发现的一个与细胞周期调控和肿瘤发生发展均密切相关的新基因，但其在肺癌中的作用仍不甚清楚。我们前期已发现，这两个基因均定位于染色体17q23区，两者共享一个独特的双向启动子，以“头对头”(head-to-head)的方式排列形成一个基因对(gene pairs)，且该“基因对”作为一个独立的转录单元发挥作用并受NFYB和p53调控。本研究将在此基础上对Ska2以及PRR11-Ska2“基因对”在肺癌中的表达水平及功能进行初步探索。　　(1) Ska2在肺癌中的表达水平及临床意义分析　　采用定量RT-PCR技术检测肺癌组织和肺正常组织中Ska2的表达水平，结果表明，Ska2在肺癌组织中表达水平高于正常肺组织，且与肺癌的病理分级和临床分期密切相关，随着分化和恶性程度的增加Ska2的表达水平不断升高。　　同时，采用生物信息学手段，分析了Ska2在肺癌中的预后价值，结果表明，Ska2高表达组的病人的总体生存期和预后无复发生存期显著低于低表达组。　　(2) PRR11-Ska2“基因对”在肺癌中的表达水平及临床意义分析　　对PRR11与Ska2在各种正常人体组织、肺癌组织和肺癌微阵列数据GSE13213中的表达水平相关性进行了分析。结果表明，在各种正常人体组织中，PRR11与Ska2的表达呈正相关;肺癌组织中PRR11与Ska2的表达呈高度正相关。在肺癌微阵列数据GSE13213中，PRR11与Ska2的表达呈高度正相关，两者的表达水平还与NFYB的表达呈正相关，两者的表达水平在野生型的p53肺癌病人组的表达水平均低于突变型p53肺癌病人组。这些结果提示，PRR11与Ska2在肺癌组织细胞中作为一个独立转录单元发挥作用，两基因在该转录单元中同时高效协调地转录，两者功能相关且同时受p53和NFYB的协调调控。　　同时，采用生物信息学手段，分析了PRR11-Ska2“基因对”在肺癌中的预后价值，结果显示，PRR11与Ska2同时高表达组的病人的总体生存期和预后无复发生存期显著低于PRR11与Ska2的单独高表达组，表明PRR11-Ska2“基因对”是个更具预后价值的标志物。　　(3) PRR11-Ska2“基因对”在肺癌中的功能分析　　采用慢病毒介导的RNA干扰技术，分别在肺癌细胞系A549、H1299中构建了阴性对照以及PRR11与Ska2基因单独沉默和联合沉默的稳定细胞株，分别命名为LV-shRNA-NC、LV-shRNA-PRR11、LV-shRNA-Ska2和LV-shRNA-P+S。Western bloting结果表明，稳定细胞株中PRR11与Ska2基因的表达被有效沉默。　　细胞表型分析结果表明，在H1299和A549两种肺癌细胞系中，与LV-shRNA-NC阴性对照组稳定细胞株相比，PRR11与Ska2基因单独沉默和联合沉默的LV-shRNA-PRR11、LV-shRNA-Ska2和LV-shRNA-P+S组稳定细胞株的增殖、迁移及侵袭能力均显著降低;且与PRR11或Ska2基因单独沉默组相比，PRR11与Ska2联合沉默组稳定细胞株的增殖、迁移及侵袭能力的降低程度更为明显。该结果提示，PRR11与Ska2对于肺癌发生发展过程均是必需的，两者功能不仅高度相关，且其功能具有一定的协同或互补效应。　　进一步通过定量RT-PCR技术检测了各组稳定细胞株中与细胞周期和肿瘤发生发展相关基因（包括CCNA1、CDC2、MAP4K4、RRM1、EPB41L3、CCNA2、NFIB和DHRS2）的表达变化。结果表明，与LV-shRNA-NC阴性对照组稳定细胞株相比，PRR11与Ska2基因单独沉默和联合沉默组稳定细胞株中，上述基因均发生了不同程度的变化（减低或升高），且在H1299和A549两种肺癌细胞系中有所不同。该结果提示，虽然PRR11与Ska2的功能高度相关，但其具体的功能和分子行为机制可能不同，且在不同的细胞系中也有所不同。　　综上，本研究结果不仅初步证实了Ska2是一个新的参与肺癌发生与发展的新基因，而且也证实了PRR11-Ska2“基因对”对于肺癌的发生发展过程是必需的，在肺癌的分子诊断和靶向治疗中具有潜在应用价值。