蟾酥来源于中华大蟾蜍和黑眶蟾蜍皮肤及耳后腺的分泌物,是一种重要的传统中药。它被应用于各种制剂,如六神丸,麝香保心丸和蟾酥注射液。临床上这些制剂被用于治疗心力衰竭,疼痛和各种癌症。总蟾毒内酯是蟾酥中的主要活性成分,超过50多种蟾毒内酯已经被分离。然而,蟾毒内酯较高的毒性、较低的生物利用度和较差的水溶性限制了其临床应用。糖基化是增加药物水溶性的普遍方法,同时也可以改善药物的药效和药代动力学性质。因此,开发一种有效的对蟾酥中总蟾毒内酯进行糖基化的方法具有重要意义。蟾酥糖基化后能降低毒性,具有临床应用前景。化学合成甾体糖苷有许多缺点,例如,区域和立体选择性差、需要保护和脱保护步骤、需要使用有毒催化剂并产生化学废物等。相反,酶催化被认为是一种新型解决甾体糖基化的方法。据文献报道,几种特定的植物细胞的悬浮培养液（例如长春花、桔梗和雪莲）,能够对华蟾毒精进行糖基化修饰。然而,副产物多,难以纯化得到目标化合物。最近,甾体的酶催化糖基化取得了重大进展。微生物糖基转移酶OleD-ASP、YjiC1和植物糖基转移酶UGT74AN1对甲型和乙型强心甾均展现出较好的转化效率,这为蟾酥中总蟾毒内酯的糖基化奠定了基础。本论文通过三种杂泛性的糖基转移酶,将蟾毒内酯转化为相应的单糖基化或二糖基化产物。通过比较三种糖基转移酶,发现YjiC1的糖基化效率最高。在YjiC1的催化下,主要成分糖基化的转化率高达90%。斑马鱼胚胎毒性和Na⁺,K⁺-ATP（NKA）酶抑制活性显示,化合物沙蟾毒精-3-O-葡萄糖（3a）对斑马鱼胚胎具有较低的毒性(LD₅₀=83.37±0.04μM,比其苷元弱10倍),相反,化合物3a表现出较强的Na⁺,K⁺-ATP（NKA）酶抑制活性(IC₅₀=0.52±0.04μM,比其苷元强3倍)。通过对蟾酥中的总蟾毒内酯进行糖基化,我们制备了总蟾毒内酯的糖基化产物。以糖基化的总蟾毒内酯为原料,参照蟾酥注射液的制备方法,我们制备了糖基化蟾酥注射液。最后用斑马鱼模型评价了两种制剂的毒性。同等浓度下,糖基化蟾酥注射液的毒性低于蟾酥注射液。