氧浓度的变化对大鼠骨髓间充质干细胞粘附能力的影响

来源 :重庆医科大学 重庆医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hdmlb2008
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背景间充质干细胞是具有多向分化潜能的非造血干细胞,已广泛应用于干细胞移植、组织工程和器官移植免疫治疗等方面,特别是成为构建组织工程血管中重要的种子细胞[1],但其具体机制不完全清楚。目的探讨在氧浓度改变对大鼠骨髓间充质干细胞粘附能力的影响。方法采用SD大鼠20只,年龄6-8周、雌雄不限、体重100g-120g,获取其股骨和胫骨骨髓细胞悬液,贴壁法分离骨髓间充质干细胞。流式细胞鉴定实验细胞CD54、 CD29、CD90、CD45表达,骨髓间充质干细胞分别在分为低氧组(1%O2)和常氧组(20%O2)培养0-7天。根据细胞培养和冲涮时氧浓度,细胞粘附实验分组为20%O2培养20%O2粘附冲涮组(A组)、1%O2培养1%O2粘附冲涮组(B组)、20%O2培养1%O2粘附冲涮组(C组)和1%O2培养20%O2粘附冲涮组(D组),比较不同氧浓度变化条件下细胞残留率。研究不同氧浓度变化对间充质干细胞表达HIF-1a,Integrin beta1,VCAM1和ICAM1的影响,实验分为4组:1组:恒定20%O2培养;2组:恒定1%O2培养;3组:20%O2培养后于1%O2继续培养2h;4组:1%O2培养后20%O2继续培养2h。结果流式细胞检测99%以上实验细胞表达CD54+、CD29+、CD90+,1%实验细胞表达CD45+,证实细胞为骨髓间充质干细胞。骨髓间充质干细胞在1%O2环境下(A组和B组)粘附能力增强,在20%O2环境下(C组和B组)粘附能力减弱(P<0.05);Integrin beta1,HIF-1a表达水平在1%O2环境下(2组和3组)增强(P<0.05)。结论本研究发现骨髓间充质干细胞随着粘附时间越长,细胞粘附能力也逐渐增强,经过低氧处理细胞的粘附力提高时间快于常氧环境
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