WRKY转录因子家族参与植物对逆境的响应,该家族成员均含有一个保守的WRKY结构域,可通过结合下游靶基因启动子区的W-box来调节植物的生理生化反应。本试验中,我们从转录组中筛选出一个甜高粱SbWRKY50（Sb09G005700）基因,并将该基因在野生型拟南芥中过量表达获得过表达株系W50-12,W50-13。利用在线网站对该基因的生物信息学进行了分析,构建了带有GFP标签的载体对SbWRKY50的定位进行分析,构建了pGBKT7-SbWRKY50载体对其进行了转录活性分析。测定和分析了盐处理下野生型和过表达植株在萌发期和苗期的各项生理指标,并筛选到该基因调控的下游靶基因,并通过荧光定量PCR、酵母单杂交和荧光素酶互补实验进行验证,阐明该基因调控植物抗盐的作用机制。本研究的主要结论是:1、SbWRKY50的CDS序列全长621bp,共编码207个氨基酸,其N端具有一个保守的WRKY结构域,C端具有一个C₂H₂的锌指结构,属于典型的II类WRKY家族蛋白。该蛋白的分子式为C₉₆₉H₁₄₅₃N₂₇₅O₃₀₅S₈,相对分子质量为22 kDa,是无跨膜螺旋区的疏水性蛋白。2、SbWRKY50的表达为组成型表达,且受高盐诱导。通过构建带有GFP标签的载体对SbWRKY50的定位进行分析,结果表明该基因定位在细胞核。构建了pGBKT7-SbWRKY50载体,通过酵母体系对其进行转录活性分析,转化酵母的结果表明该基因具有转录激活活性。3、通过Real-time PCR分析发现,在W50-12,W50-13这两个株系中SbWRKY50的表达量较高,说明SbWRKY50已成功在拟南芥中过量表达。4、统计野生型和过表达植株的萌发率和根长发现过表达株系的萌发率和根长均显著小于野生型植株。对幼苗期的植株进行生理指标的测定发现盐胁迫条件下,过表达株系的生物量和钾离子含量较野生型来说均显著降低,而过氧化氢、超氧阴离子自由基和钠离子含量均显著增加。5、通过实时荧光定量PCR检测到盐胁迫条件下,一些响应渗透胁迫（SOD和APX）、氧化胁迫（RD29B和p5CS1）、离子胁迫（CLC-C、SOS1和HKT1）的基因在过表达株系中的表达水平均具有显著变化。酵母单杂交和荧光素酶互补成像实验均证明SbWRKY50可直接与拟南芥的SOS1、甜高粱的SOS1、HKT1基因的上游启动子结合。这些结果表明,新的WRKY转录因子SbWRKY50通过调控离子平衡参与植物抗盐反应。但是,在甜高粱和拟南芥中的调控机制不同,这可能与它们不同的抗盐能力有关。这些数据为不同作物的耐盐性改造提供了依据。