【摘 要】
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目的:本研究旨在确定人尿源性干细胞来源外泌体（USCs-exos）对髓核细胞（NPCs）干预后,对压力诱导条件下NPCs凋亡、椎间盘退变（IDD）的作用及作用机制的初步探索。方法:从健康成人尿液中获取人尿源性干细胞（USCs）,应用倒置显微镜、三系分化实验、流式细胞分析对所获取细胞进行鉴定;使用透射显微镜、纳米粒径分析、WB对提取的外泌体进行鉴定并观察NPCs对外泌体的摄取。从腰椎间盘突出症患者术
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目的:本研究旨在确定人尿源性干细胞来源外泌体（USCs-exos）对髓核细胞（NPCs）干预后,对压力诱导条件下NPCs凋亡、椎间盘退变（IDD）的作用及作用机制的初步探索。方法:从健康成人尿液中获取人尿源性干细胞（USCs）,应用倒置显微镜、三系分化实验、流式细胞分析对所获取细胞进行鉴定;使用透射显微镜、纳米粒径分析、WB对提取的外泌体进行鉴定并观察NPCs对外泌体的摄取。从腰椎间盘突出症患者术中获取NPCs,使用WB、q RT-PCR检测压力条件下NPCs的ER应激水平。设对照组、48H组以及USCs-exos组,其中对照组不做处理,48H组压力培养48H,USCs-exos组压力培养48H并加入USCs-exos进行干预。采用WB、q RT-PCR、TUNEL分析对压力条件下及外泌体干预后内质网应激情况进行测定;并对AKT、ERK通路进行部分检测。结果:人尿源性干细胞呈短梭形或纺锤形;可成功进行成骨、成脂、成软骨分化;流式细胞分析CD29,CD44,CD73表达阳性;USCs-exos在透射电镜下表现为中心凹陷类圆形,结合纳米粒径分析测量出其直径在50-100nm;WB显示CD63、Tsg101呈高表达,Calnexin低表达或不表达;外泌体可被髓核细胞摄取。压力培养后髓核细胞中ER应激标志物GRP78、CHOP随时间延长而增加（P<0.05）。USCs-exos能够改善ER应激并减少由此导致的UPR的过度活化及细胞凋亡（P<0.05）。USCs-exos可通过AKT和ERK信号通路抑制ER应激的发生,减少细胞凋亡（P<0.05）。结论:USCs-exos在改善压力诱导条件下NPCs的凋亡及椎间盘退变方面效果显著,对内质网应激的抑制以及AKT和ERK通路的激活可能发挥了重要的作用,可成为椎间盘退变疾病的新的研究方向和治疗方式。
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