目的：1.全面研究原发性肺部涎腺肿瘤,包括黏液表皮样癌、腺样囊性癌和上皮-肌上皮癌的临床-病理特征。2.研究原发性肺部黏液表皮样癌中MAML2基因重排的发生率,以及发生MAML2重排的黏液表皮样癌的临床行为和病理学特征；并且与传统的预后因子相比较,分析MAML2重排能否更优的进行危险程度分层。3.研究MAML2基因重排后对下游信号转导通路(cAMP/CERB通路和Notch通路)靶分子表达的可能影响。4.以肺部腺鳞癌为对照,研究肺黏液表皮样癌中MALM2重排和相关免疫组化标记的鉴别诊断价值。方法：1.临床病史采集和随访：收集复旦大学附属中山医院和上海交通大学附属胸科医院2001年5月至2013年1月期间原发性肺部涎腺肿瘤包括黏液表皮样癌、腺样囊性癌和上皮-肌上皮癌的患者,回顾性分析其临床特点、影像学特征和组织学形态。同时对所纳入的研究对象进行随访,记录其预后情况。2.收集中山医院和胸科医院病理科肺原发性黏液表皮样癌的石蜡包埋组织标本,同时收集部分原发性肺部腺鳞癌的石蜡包埋标本作为对照。3.原位荧光杂交法(FISH)同时检测黏液表皮样癌和腺鳞癌石蜡标本中MAML2基因的重排情况。4.免疫组化(EnVision+两步法)检测石蜡标本中cAMP/CERB通路的下游蛋白(FLT1, NR4A2)和Notch通路下游蛋白(HES1)的表达水平。结果：1.临床特点本研究共收集88例原发性肺涎腺肿瘤患者,其中黏液表皮样癌69例,腺样囊性癌12例,上皮-肌上皮癌7例。其临床特点总结如下：①性别：男性47例,女性41例。②年龄：介于7—75岁之间,中位年龄48岁。③最常见的起病症状：咳嗽(48.9%)。④部位：多累及肺叶(84.1%),其次为主支气管(10.2%)。⑤TNM分期：Ⅰ期69.3%,Ⅱ期18.2%,Ⅲ期10.2%,Ⅳ期2.3%。⑥治疗：84/88例均接受手术治疗,其余4例接受化疗；手术的最常见术式为肺叶切除术。研究发现黏液表皮样癌、腺样囊性癌及上皮-肌上皮癌这三种肺原发性涎腺肿瘤亚型之间各临床参数均无显著统计学差异。2.影像学表现共收集30例肺部黏液表皮样癌和8例腺样囊性癌治疗前的影像学资料。CT检查结果如下：①病变部位：大部分黏液表皮样癌中位于中央肺(20/30,66.7%),小部分位于外周肺(10/30,33.3%)；腺样囊性癌中2例位于中央肺,8例位于外周肺。②病变形态：黏液表皮样癌中26例CT表现为类圆形占位,4例为形态不规则的分叶状病灶；腺样囊性癌中5例表现为类圆形占位,3例为形态不规则的分叶状病灶。3例中央型黏液表皮癌病肺出现支气管狭窄或阻塞,2例伴有阻塞性肺炎表现。其中1例腺样囊性癌患者PET/CT检查示肿瘤组织18F-FDG摄取轻度而明显的增高。3.组织病理学检查黏液表皮样癌的组织学病理学特征为①低级别：多呈现大的或小的腺腔,以及黏液细胞浸润,核分裂象少见,并且具有较温和的细胞学形态；②高级别：腺腔和黏液细胞均较少,多见核分裂象和细胞多形性；③中级别：组织形态特点介于低级别和高级别之间。腺样囊性癌的组织病理学特征为大量具有分泌特征的导管细胞,可见核深染和扭曲的肌上皮细胞。肿瘤镜下均呈筛孔状,可见微囊空隙,囊泡内有透明的嗜碱性的黏液样物质。上皮-肌上皮癌组织病理学上表现为双层导管样组织学。内层细胞是立方状的,胞浆内含细颗粒；外层细胞是肌上皮细胞,胞浆透亮。另外,组织学证实15例肺涎腺肿瘤患者有淋巴结受累,其中12例为黏液表皮样癌,5例为腺样囊性癌。肿瘤胸内侵犯见于16例(23.1%)黏液表皮癌和5例(41.6%)腺样囊性癌。4.预后除1例患者围手术期死亡外,其余研究对象均进行了随访。随访时间3～134个月不等,中位随访时间为49个月。88例肺涎腺肿瘤患者中,15例发生了复发或转移,其中4例手术切缘为阳性。腺样囊性癌(5/12,41.7%)发生复发或转移的倾向高于黏液表皮样癌(9/69,13.0%)和上皮-肌上皮癌(1/7,14.3%)。8例患者死于复发或转移,其中6例为黏液表皮样癌(高级别5例,低级别1例),2例为腺样囊性癌。5.分子遗传学本研究利用MAML2荧光探针共对42例肺部黏液表皮样癌和40例肺部腺鳞癌的石蜡组织标本进行了原位荧光杂交(FISH)检测,结果发现50%黏液表皮样癌发生了MAML2基因重排,且重排阳性患者的中位年龄显著低于重排阴性组的中位年龄(33 vs.60,p=0.001)。MAML2重排阳性主要见于低-中级别肿瘤组织,高级别肿瘤组织并未发现重排。40例腺鳞癌均为发生MAML2重排。免疫组织化学检测发现MAML2重排阳性的肿瘤组织中FLT1和HES1的表达显著低于重排阴性组(p<0.001和p=0.023)。6.生存分析原发性肺部涎腺肿瘤患者3年生存率为91.3%,5年生存率为86%,10年生存率为80.6%。3年、5年和10年的无病生存率分别为90.1%、78.6%和55%。黏液表皮样癌、腺样囊性癌和上皮-肌上皮癌之间的生存率和无病生存率无显著统计学差异(p=0.518和0.082)。TNM分期、淋巴结转移、胸内侵犯及手术切缘阳性是影响总生存率(p=0.000,0.029,0.000,0.004)和无病生存率(p=0.018,0.042,0.002,0.002)的风险因子。Cox’s回归分析显示胸内侵犯是影响总生存率(p=0.039, HR:1.129,95%CI:1.006-1.266)和无病生存率(p=0.011,HR:1.071, 95%CI:1.016-1.128)的独立风险因子。此外,对于黏液表皮样癌患者,病理分级也是影响其总生存率(p=0.006, HR:0.045,95%CI:0.005-0.410)和无病生存率(p=0.001, HR:0.067,95%CI:0.013-0.337)的独立风险因子。遗传学上,MAML2基因重排阳性的肺黏液表皮样癌患者总生存率和无病生存率显著优于重排阴性组(p=0.023和p=0.027)。结论：1.原发性肺部涎腺肿瘤是一组低度恶性的肿瘤,中国人群中以黏液表皮样癌最多发,其次是腺样囊性癌。不同组织学亚型之间生存率并无显著差异。完善的临床、影像学和病理学检查对于评估风险分层和确定诊疗措施十分的重要。2.手术仍然是首选治疗手段；TNM分期、淋巴结转移、胸内组织受累、组织学分级以及手术切缘都是影响肺部涎腺肿瘤患者预后的重要因素。因此,临床应根据患者状态以及这些预后因素采取个体化的治疗措施。3.遗传学上,肺部黏液表皮样癌较易发生特异性的MAML2基因重排,但是肺部腺鳞癌不发生该遗传学异常。因此,MAML2重排可能作为肺黏液表皮样癌诊断与鉴别诊断的分子标志物。当然,这还需要大规模前瞻性研究进一步证明。4. MAML2重排的肺黏液表皮样癌FLTl和HESl表达水平显著下降。MAML2重排与患者预后负相关,FLT1表达与患者预后正相关。因此,MAML2重排结合FLT1表达的检测还可能在分子水平上对肺黏液表皮样癌患者进行预后评估。同样,还有待前瞻性临床试验的进一步证明。5. FISH技术由于操作简单、敏感性高并且与RT-PCR检测结果一致性较高,可作为MAML2重排检测的优选。6.对于MAML2重排阴性的黏液表皮样癌,其生物学异常仍需进一步的研究。