金花葵中提取生物活性物质的研究

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金花葵为锦葵科、秋葵属1年生草本植物,其花、茎、叶、种子中都含有丰富的生物活性物质,如黄酮、生物碱、金丝桃苷、叶黄素等。黄酮类化合物本身具有显著的抗氧化性能,有很高的药用价值。生物碱则是中药中具有生理活性的重要组分,对心血管系统、中枢神经系统等多方面具有明显的药理活性。本课题以金花葵的种子、茎为原材料,分别采用传统的乙醇浸提法和超声波强化乙醇浸提法分别从金花葵的种子、茎中提取黄酮类化合物。以芦丁为对照品制作标准曲线,运用硝酸铝比色法测定总黄酮的含量。通过单因素试验方法,确定乙醇浓度、浸提时间、超声功率、超声温度、料液比等各因素的提取条件;同时应用回归正交试验设计方法优化其最佳提取条件。再用薄层层析法(TLC)对金花葵中的黄酮类物质作分离分析。最后以芦丁和槲皮素为标准物,采用ODS色谱柱,二极管阵列检测器(DAD)高效液相色谱法分离分析金花葵中的芦丁和槲皮素。我们以提取过黄酮的金花葵种子为原材料进一步提取生物碱,合并过AB-8树脂黄酮提纯的废液,利用碘化铋钾试剂在酸性溶液中与生物碱反应生成桔红色沉淀定性鉴别生物碱,根据其最大吸收波长测定总生物碱的OD值。通过单因素试验方法,确定乙酸浓度、浸提时间、浸提温度、料液比等四种因素的提取条件,同时应用回归正交试验设计方法优化其最佳提取条件。最后用TLC对金花葵中的生物碱类物质作分离分析。得到金花葵种子中黄酮的最佳提取条件为乙醇浓度70%,浸提时间1.8h,浸提温度63℃,料液比为1:46.4g/mL,提取率为4.03mg/g;金花葵茎中黄酮的最佳提取条件为超声功率400W,提取时间48min,超声温度57.5℃,料液比为1:12g/mL,提取率为1.02mg/g;金花葵种子中生物碱的最佳提取条件为乙酸浓度0.9%,浸提温度37℃,浸提时间60min,料液比1:16.5g/mL。生物黄酮与生物碱的开发是当今世界上最具活力的项目。将本课题的成果运用到黄酮与生物碱的工业生产中,将会给企业带来巨大的经济利益,同时也可带动农业生产。
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