【摘 要】
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目的:构建含Gab2基因CDS片段,FL片段以及FLM表达载体并探究Gab2基因是否具有non-coding功能。方法:构建CDS,FL和FLM基因表达载体,然后构建瞬转乳腺癌细胞系和结肠癌细胞系,通过
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目的:构建含Gab2基因CDS片段,FL片段以及FLM表达载体并探究Gab2基因是否具有non-coding功能。方法:构建CDS,FL和FLM基因表达载体,然后构建瞬转乳腺癌细胞系和结肠癌细胞系,通过western blot检测瞬转细胞系中相关蛋白分子的表达情况,再通过各种细胞功能实验检测,对比转入三种质粒载体后的细胞功能差异,以及用Q-PCR检测下游基因表达情况的差异,从而作出Gab2基因CDS区域以及其真正全长FL的比较,推测Gab2基因除了coding功能外是否还具有一定的non-coding功能。结果:成功构建出了Gab2基因的CDS,FL,FLM表达载体,并构建了相应的瞬转细胞用于功能实验和实时定量PCR检测,在功能实验的各项指标以及Real-time PCR的检测结果中都显示着Gab2基因的CDS片段功能与其全长FL有一定的相似性,但也存在着很大的差异,甚至有很多相反的情况出现。结论:Gab2基因的功能可能并不仅仅取决于其CDS区域,其非编码区可能也发挥着很重要的功能,致使整个基因的功能与由其编码区域单独的功能有很多的差异,因此即使是对于所熟识的coding基因,也应当从整体来看待一个基因的功能,而不是只着重于转录翻译的CDS区。
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