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1研究背景和目的食管癌的发生是一个多因素多阶段复杂的过程,在西方,吸烟是食管癌发生较为肯定的危险因素,而在中国,其结论尚有争议。近年来的研究提示吸烟在其发生过程中起着非常重要的作用,与吸烟量呈现剂量-效应关系。但是,目前关于开始吸烟年龄(Age of Smoking Initiation, ASI)与食管癌患者发病年龄(The Onset Age, TOA)的关系很少有报道。同样,术前吸烟对食管癌预后生存期的影响也很少有研究,由于样本量小等一些原因,结果却不尽一致,一些学者的研究显示,术前吸烟是食管癌患者预后的独立影响因素,吸烟患者的5年生存率差于不吸烟患者；而一些研究显示,术前吸烟对食管癌的预后无影响。此外,本课题组在前期的研究中,利用全基因组关联分析(GWAS)技术发现了18个SNPs,发现其与食管癌高发病风险密切相关,但是其与食管癌的预后生存期的关系尚不清楚。本研究旨在通过对4330例食管鳞癌患者的开始吸烟年龄和男女吸烟史的分析,进一步结合生存期,阐明开始发病年龄与吸烟年龄和关系,以及术前吸烟对预后的影响；通过对18个SNPs的变异对食管鳞癌患者生存期的影响,初步探讨吸烟对预后影响的分子机制。2材料与方法2.1研究对象本研究的所有资料均来源于河南省食管癌重点开放实验室1973-2012年生物样品信息资料库。有吸烟史、明确的随访纪录和术后病理证实为食管鳞癌的4330例患者最终进入本研究,其中男性2596例,年龄34-88岁,中位年龄60岁；女性1734例,年龄36-94岁,中位年龄61岁。2.2问卷调查、医院资料核实和生存随访部分患者采用入户问卷调查(问卷的内容包括：姓名、性别、出生日期、发病年龄、家庭地址、电话、治疗医院、吸烟史、恶性肿瘤家族史等)和电话随访记录患者的基本信息和生存状况,并根据患者提供的治疗医院,复核、补充患者治疗方式和病理诊断。随访时间从手术当日起,截止到2012年12月8日,其中患者因食管癌死亡的进入本研究,非食管癌死亡的未进入本研究。2.3吸烟的标准吸烟：连续吸烟一年以上,每天≥5支2.4血样收集和DNA提取和Taqman基因分型征得患者同意后,签署知情同意书,采集5ml EDTA抗凝外周静脉血。采用Flexi Gene DNA提取试剂盒(Qiagen)提取血标本中的基因组DrA。采用Taqman(?)基因分型技术,检测前期GWAS工作中发现的有明显差异的18个SNPs。2.5统计学分析采用SPSS17.0统计软件,Spearman相关分析、Kaplan-Meier法,Log-rank检验差异、卡方检验、Cox模型等统计方法,检验水准：α=0.05。3.结果3.1生存情况11865例患者中家庭住址准确、联系电话清楚8914例,成功随访4330例,随访成功率为48.6%。该组患者的5年生存率为52%,中位生存期为67个月。3.2发病年龄与开始吸烟年龄和烟龄的关系发病年龄与开始吸烟年龄和烟龄高度相关(r=0.474,P均<0.001),发病年龄与开始吸烟年龄的线性相关系数为0.221。3.3吸烟与不吸烟患者生存期的比较1684例吸烟和2646例不吸烟患者的预后生存期有显著的差别,不吸烟患者的生存期明显好于吸烟患者(x2=22.542,P<0.001)；男性1649例吸烟和947例不吸烟患者的生存期无明显差异(x2=1.354,P=0.245>0.05)；1649男性吸烟患者和1699例女性不吸烟患者的生存期有明显的差异(x2=37.110,P<0.001)；947例男性不吸烟患者与1699例女性不吸烟患者的生存期有着明显的差异(x2=16.884,P<0.001)；3.418个SNPs的哈迪-温伯格遗传平衡检验在2129例研究对象中,哈迪-温伯格遗传平衡检验结果提示除rs614125(χ2=19.763,P<0.001)和rs283856(χ2=5.970,P=0.015)位点不符合哈迪-温伯格遗传平衡定律外,其余16个SNPs均符合哈迪-温伯格遗传平衡定律(所有P>0.05)。3.516个SNPs的生存分析及与吸烟史的关系16个SNPs各基因型在吸烟史患者中的分布中均无统计学意义(P均>0.05)；运用Kaplan-Meier生存曲线,Log-rank检验显示16个SNPs各基因型之预后的生存期均无意义(P均>0.05)4结论4.1.开始吸烟年龄和烟龄与食管鳞癌患者的发病年龄高度相关；4.2.术前吸烟对食管癌的预后无影响；4.3.16个SNPs之间的各基因型对食管癌的预后无影响。