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Runx2和Osterix是成骨细胞分化过程中的重要转录因子。在调控干细胞向成骨细胞分化过程中Runx2或Osterix的表达和活性不仅受到某些细胞内信号途径的调节，还需要与其他因子相互作用，其中Runx2表达受到许多转录因子、生长因子与激素的影响。Runx2的活性同时也受到包括表观遗传因素在内的复杂的调控网络影响。例如，组蛋白去乙酰化酶（HDACs）与Runx2相互作用，调控Runx2的活性和影响骨的形成。我们的研究是在已有HDACs与Runx2的相互作用的研究成果的基础上开展的。我们研究了Sirt2对成骨细胞分化的影响。首先，我们检测了Sirt2在各种成骨细胞系中内源蛋白水平，然后建立了稳转Sirt2的C3H10T1/2起源的各种细胞系。结果发现，Sirt2在大鼠ROS17/2.8骨肉瘤细胞、MC3T3-E1前成骨细胞、MLO-Y4骨细胞、间充质干细胞C3H10T1/2四种细胞中表达，但表达较弱，同时Sirt2在稳转的细胞系中高表达。同时通过荧光素酶双报告实验检测发现：细胞未分化条件下Runx2促进骨钙蛋白（OCN）启动子活性，而Sirt2可抑制Runx2对OCN启动子活性的激活作用；分化48h后，Sirt2仍然抑制Runx2对OCN启动子活性的作用，而在本研究体系中Osterix对OCN启动子活性没有影响所以不能分析Sirt2是否抑制Osterix对OCN启动子的激活。进一步从RT-PCR及宏观角度碱性磷酸酶(ALP)活性染色结果分析，发现Sirt2可能不影响成骨分化过程中早期指标ALP的表达和活性，但Sirt2可能影响Runx2和Osterix对OCN表达的调控。结合Sirt2对Runx2介导的OCN启动子活性和基因表达的抑制影响，我们推测Sirt2可能影响晚期成骨分化过程。Sirt2对Runx2或Osterix介导的成骨分化的影响的作用机制是怎样的呢？我们通过免疫荧光实验发现Runx2和Osterix主要定位于细胞核中，而Sirt2无论内源的还是在稳转细胞系中都主要定位于细胞质中，由此提示我们Sirt2对Runx2或Osterix的影响可能是通过间接方式，而非直接方式。具体的作用机制有待于进一步的研究。同时，因为Sirt2具有抑制有丝分裂的活性，我们接下来检测了Sirt2是否影响细胞的增殖，根据细胞计数绘制的增长曲线发现Sirt2抑制过表达Runx2的C3H10T1/2细胞的增殖。我们由此推测，Sirt2可能抑制早期分化的成骨细胞的增殖，尽管Sirt2不影响以ALP活性为代表的早期分化。