家蝇幼虫抗菌蛋白的诱导、提取及特性研究

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目的:用不同诱导源诱导家蝇幼虫,比较两种抗菌蛋白提取方法,观察抗菌蛋白产生的动力学变化、抗菌作用及蛋白组分,为进一步研究昆虫抗菌蛋白的产生、免疫机制及家蝇幼虫抗菌蛋白的应用提供实验依据.方法(1)用大肠杆菌、金黄色葡萄球菌诱导家蝇幼虫,分别用组织匀浆和血淋巴提取抗菌蛋白进行抑菌实验,比较抑菌效果.(2)取5种诱导源诱导后不同时间的组织匀浆提取抗菌蛋白进行抑菌实验,观察不同诱导源诱导后抗菌蛋白产生的动力学变化.(3)用不同细菌进行抑菌实验,观察5种诱导源诱导组抗菌蛋白的抑菌特性.(4)5种诱导源诱导组抗菌蛋白经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,观察抗菌蛋白的组分变化.结果:(1)用组织匀浆提取抗菌蛋白量多且抑菌效果好.(2)各诱导组抗菌蛋白的抗菌活性较对照组明显增高,金黄色葡萄球菌诱导组及紫外线诱导组抗菌蛋白在诱导后48h达高峰;大肠杆菌诱导组、LPS诱导组在诱导后36h达高峰.(3)各诱导组产生的抗菌蛋白均能抗多种G+菌、G-菌和耐药菌株,但对不同细菌的抗菌活性有差别.(4)5种诱导源诱导组抗菌蛋白中有2条电泳带与对照组完全相同,但含量高于对照组;5种诱导源诱导组与对照组比较均出现不同的新的蛋白带.结论:(1)用组织匀浆提取抗菌蛋白是一种较好的方法.(2)5种诱导源诱导后抗菌蛋白产生的高峰时间不同.(3)细菌诱导的抗菌蛋白抑菌效果最好,热诱导也是一种较理想的诱导方法.(4)家蝇幼虫产生的抗菌蛋白抗菌谱广.(5)不同诱导源可诱导家蝇幼虫产生不同的新蛋白.
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