黄芪注射液对脓毒症幼鼠心肌损伤的保护作用

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目的:通过检测脓毒症幼鼠外周血清cTnI、心肌组织中IL-6、IL-10浓度变化和心肌组织中JAK2和STAT3蛋白表达情况,探究黄芪注射液对脓毒症幼鼠心肌损伤的保护作用及其可能机制。方法1.48只5周龄SPF级SD大鼠随机分为3组:假手术组(Sham组)、脓毒症组(CLP组)、黄芪注射液组(AS组),各组内再分为8h和24h两个时间亚组(n=8)。选择盲肠结扎穿孔术法建立脓毒症幼鼠模型。Sham组开腹后寻找盲肠后在其下方穿线但不予结扎、穿孔;CLP组开腹后于盲肠中部结扎并穿孔,术后立即腹腔注射生理盐水5ml/Kg;AS组同CLP组手术操作步骤,术后立即腹腔注射黄芪注射液5ml/Kg。各组大鼠术后均皮下注射生理30ml/Kg进行液体复苏以补充手术累积损失量。2.各组幼鼠分别在术后8h或24h腹主动脉采血和留取心肌组织。酶联免疫吸附法检测血清cTnI和心肌组织中IL-6与IL-10浓度变化,免疫组化技术观察心肌组织JAK2、STAT3蛋白表达情况,HE染色观察心肌组织病理变化。结果:1.心肌病理组织光镜下变化:CLP组较Sham组心肌细胞及肌纤维形态无明显异常。CLP组较Sham组可见心肌细胞明显水肿,部分可见空泡样变,细胞核裂解形态不一,肌纤维束排列疏松、紊乱。AS组较CLP组各时间程度明显减轻。2.血清cTnI变化:CLP组与AS组分别较Sham组各时间点c TnI均显著升高(P<0.01);AS组较CLP组8h明显降低(P<0.05),24h降低则更为显著(P<0.01);CLP组和AS组内24h较8h时间点均明显升高(P<0.05),Sham组两时间点无明显差异(P=0.586)。3.心肌组织IL-6变化:CLP组和AS组分别较Sham组各时间点IL-6均显著升高(P<0.01);AS组较CLP组各时间点均明显降低(P<0.05);CLP组和AS组内24h较8h均明显升高(P<0.05),Sham组两时间点无明显差异(P=0.509)。4.心肌组织IL-10变化:CLP组和AS组分别较Sham组各时间点IL-10均显著升高(P<0.01);AS组较CLP组8h无明显差异性(P=0.318),但24h明显升高(P<0.01);CLP组和AS组内24h较8h均显著升高(P<0.01);Sham组两时间点则无明显差异(P=0.485)。5.心肌组织JAK2蛋白表达情况:CLP组与AS组分别较Sham组各时间点均显著升高(P<0.01);AS较CLP组8h明显降低(P<0.05),24h则显著降低(P<0.01);CLP组和AS组内24h较8h时间点均明显升高(P<0.05),Sham组两时间点比较无明显差异(P=0.558)。6.心肌组织STAT3蛋白表达情况:CLP组和AS组分别较Sham组各时间点均显著升高(P<0.01);AS组较CLP组各时间点均显著降低(P<0.01);CLP组和AS组内24h较8h时间点均明显升高(P<0.05),Sham组两时间点比较无明显差异(P=0.599)。7.JAK2分别与IL-6和IL-10之间进行相关性分析:CLP组两时间点心肌JAK2与IL-6和IL-10表达均成正相关(r>0.7,P<0.05)。8.STAT3分别与IL-6和IL-10之间进行相关性分析:CLP组两时间点心肌STAT3与IL-6和IL-10表达均成正相关(r>0.7,P<0.05)。结论:黄芪注射液对脓毒症幼鼠心肌损伤具有保护作用,其可能机制为通过抑制JAK/STAT信号通路转导活化,下调促炎因子IL-6和上调抗炎因子IL-10的释放,改善机体促炎/抗炎失衡对心肌细胞的损伤。
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