目的:猴耳环作为清热解毒类中药长期在临床上使用,本文在确定了猴耳环抗氧化和抗补体活性部位的基础上,进一步明确了猴耳环的小分子活性成分,并以体内模型验证了猴耳环活性部位对咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型的干预作用,最后对猴耳环的提取工艺进行了优化研究,以期从抗炎和免疫调节的角度深入揭示猴耳环清热解毒的药效物质基础,为系统阐明猴耳环清热解毒的生物学本质、把握其性味归经的科学内涵提供实验药理学依据,为猴耳环药物资源的合理开发应用提供理论基础。方法:1利用DPPH自由基清除能力法、细胞溶血法分别测定猴耳环醇提物、醇提物分极性萃取部位（乙酸乙酯部位、正丁醇部位、萃取后剩下的水层）、水提物及其水提醇沉上清部位、水提醇沉沉淀部位的抗氧化、抗补体活性。2采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20柱层析和TLC等分离纯化的方法对有活性的乙酸乙酯部位进行系统的化学成分研究,利用核磁共振等方法对化合物的结构进行鉴定。3用DPPH自由基清除能力法和细胞溶血法测定分离得到的单体化合物的抗氧化和抗补体活性。4通过最大耐受量实验确定猴耳环的安全用药范围。5建立咪喹莫特诱导的小鼠银屑病模型,采用PASI评分,HE染色检测皮肤组织的形态学变化、测量脏器指数（脾脏指数和胸腺指数）以及免疫组化检测皮肤组织中PCNA的表达,考察猴耳环乙醇提取物、水提醇沉上清部位对小鼠银屑病的干预作用。6综合化学成分分析和抗炎活性的评价指标,用正交试验法对猴耳环的乙醇提取工艺进行优化研究。以醇浸膏得率、总黄酮和没食子酸从生药中的提取率以及生药抗氧化(IC₅₀值)、抗补体(CH₅₀值)活性为考察指标,选择乙醇体积分数（%）、提取时间（h）、乙醇用量（倍）和提取次数（次）为考察因素,利用正交试验L₉（3⁴）确定猴耳环的最佳醇提工艺。结果:1猴耳环乙醇提取物和水提物均具有较强的抗氧化、抗补体活性,IC₅₀值分别是0.22±0.01 mg/m L、0.52±0.01 mg/m L,CH₅₀值分别是0.06±0.00 mg/m L、0.04±0.00mg/m L。乙醇提取物的不同极性溶剂萃取部位中活性最强的是乙酸乙酯部位,其IC₅₀和CH₅₀分别是0.29±0.01 mg/m L、0.06±0.00 mg/m L;水提物中活性最强的是水提醇沉上清部位,其IC₅₀和CH₅₀分别是0.37±0.01 mg/m L、0.06±0.00 mg/m L。2从猴耳环乙酸乙酯部位分离得到7个化合物,分别是:β-谷甾醇（β-sitosterol,HEH-1）、没食子酸乙酯（ethyl gallate,HEH-2）、没食子酸（gallic acid,HEH-3）、槲皮素（quercetin,HEH-4）、山柰酚（kaempferol,HEH-5）、杨梅素（myricetin,HEH-6）、7-没食子酰基特利色黄烷（7-O-galloyltricetiflavan,HEH-7）。其中山柰酚（kaempferol,HEH-5）、杨梅素（myricetin,HEH-6）为首次从猴耳环中分离得到。3没食子酸乙酯（HEH-2）、没食子酸（HEH-3）、槲皮素（HEH-4）、山柰酚（HEH-5）、杨梅素（HEH-6）、7-没食子酰基特利色黄烷（HEH-7）显示了不同程度的抗氧化活性,其IC₅₀值在0.22～0.64 m M之间。没食子酸乙酯（HEH-2）和没食子酸（HEH-3）没有抗补体作用,槲皮素（HEH-4）、山柰酚（HEH-5）、杨梅素（HEH-6）、7-没食子酰基特利色黄烷（HEH-7）显示了不同程度的抗补体作用,其CH₅₀值在0.35～1.03 m M之间。7-没食子酰基特利色黄烷（HEH-7）抗氧化活性最强,IC₅₀值为0.22±0.01 m M;杨梅素（HEH-6）的抗补体活性最强,CH₅₀值为0.35±0.01 m M。构效关系分析结果表明,黄酮类化合物的酚羟基数目越多,抗氧化能力越强;而酚羟基的数目与抗补体活性没有相关性。4急性毒性预实验结果表明猴耳环乙醇提取物和水提物均没有急性毒性,猴耳环乙醇提取物和水提物的最大耐受量分别为15 g/kg、27 g/kg。5猴耳环乙醇提取物对咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型有改善作用。PASI评分表明实验造模成功,但未能发现有剂量依赖性;HE染色结果表明皮损组织的棘层增厚情况得到明显改善;降低了胸腺指数;对脾脏指数也有较好的抑制作用且有量效关系;能抑制PCNA的表达,且有很好的剂量依赖性;对CD3的产生没有影响。6猴耳环水提醇沉上清部位对咪喹莫特诱导小鼠银屑病模型有治疗作用。PASI评分表明实验造模成功,但未能发现量效关系;皮肤HE染色能明显看到给药后皮肤棘层增厚得到改善,有量效关系;降低了胸腺指数;对脾脏指数也有很好的抑制作用,有量效关系;能抑制PCNA的大量表达,有很好的量效关系。7正交实验优化猴耳环醇提的最佳工艺条件为:用药材10倍量的50%乙醇加热回流提取2次,每次1 h。结论:1本研究确定了猴耳环抗氧化、抗补体的活性部位,对醇提物的乙酸乙酯部位进行了化学成分研究,并对单体化合物进行了体外活性测试,表明黄酮类具有较好的抗氧化和抑制补体的活性且有一定的构效关系。7-没食子酰基特利色黄烷（HEH-7）、杨梅素（HEH-6）可分别作为天然抗氧化剂和补体抑制剂的备选药物,也很有可能是猴耳环发挥抗炎和免疫调节作用的主要活性成分。2猴耳环醇提物、水提醇沉上清部位能明显改善咪喹莫特诱导的Balb/c小鼠银屑病的皮损症状,表现为抑制角质形成细胞的增殖、降低脾脏指数、降低棘层厚度。