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目的:1.观察固体分散剂型的姜黄素类化合物对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍模型的影响,初步探索其作用机制。2.观察四氢姜黄素固体分散剂对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍模型和H202氧化损伤PC12细胞模型的影响,进一步探讨其对乙酰胆碱能系统、抗氧化及抗细胞凋亡的作用机制。方法:1.姜黄素类化合物改善学习记忆障碍的活性筛选实验:采用东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍模型,给药组小鼠分别灌胃姜黄素类化合物(动物实验各化合物均为固体分散剂):姜黄素(Cur,200 mg/kg)、去甲氧基姜黄素(DMC,200 mg/kg)、双去甲氧基姜黄素(BDMC,200 mg/kg)和四氢姜黄素(THC,200 mg/kg):①姜黄素类化合物对学习记忆障碍小鼠的影响(Morris水迷宫法);②姜黄素类化合物对学习记忆障碍小鼠脑组织病理学检查;③姜黄素类化合物对学习记忆障碍小鼠脑组织中乙酰胆碱转移酶(ChAT),乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱(ACh)的含量的影响(免疫组化法)。2.四氢姜黄素(THC)固体分散剂对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍模型改善作用的研究:采用东茛菪碱致小鼠学习记忆障碍模型,分别灌胃四氢姜黄素(THC):高(400mg/kg)、中(200mg/kg)和低(100mg/kg)剂量:①通过水迷宫行为学观察四氢姜黄素(THC)对学习记忆的影响;②通过病理学Nissl观察小鼠脑组织中尼氏小体;③四氢姜黄素对脑组织中ChAT,AChE和ACh含量的影响(免疫组化检测);④四氢姜黄素对海马中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px),丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD)所造成的浓度影响。3.四氢姜黄素(THC)对H202诱导PC12细胞凋亡的作用研究:①通过CCK-8法测定四氢姜黄素对PC12细胞活性改变,PI、Hoechst染色检测细胞凋亡,②ROS染色检测细胞活性氧变化。结果:1.姜黄素类化合物改善学习记忆障碍的活性筛选试验:①与模型组比较,在水迷宫定位训练中,姜黄素(Cur,200mg/kg)和双去甲氧基姜黄素(BDMC,200 mg/kg)可缩短小鼠潜伏期(P<0.05),降低小鼠在水中的运动总距离(P<0.01),四氢姜黄素THC 200 mg/kg)可明显缩短小鼠潜伏期(P<0.01),降低小鼠在水中的运动总距离(P<0.01);空间探索时,姜黄素(Cur,200 mg/kg)和双去甲氧基姜黄素(BDMC,200 mg/kg)可明显增加小鼠进入有效区域的时间(P<0.01),小鼠进入原平台位置次数明显增多(P<0.01);四氢姜黄素(THC,200 mg/kg)也可使小鼠进入有效区域的时间,运动距离加长,并且进入原平台位置次数增多(P<0.01)。显示姜黄素类化合物可改善小鼠对空间学习记忆的能力。②给药组小鼠与造模组相比无明显差异。③通过小鼠大脑进行免疫组化检测可知,姜黄素化合物均能升高小鼠大脑的ChAT蛋白含量:姜黄素(P<0.05)、去甲氧基姜黄素(P<0.05)、双去甲氧基姜黄素(P<0.05)和四氢姜黄素(P<0.01);同时可降低小鼠大脑的AChE蛋白含量:姜黄素(P<0.05)、去甲氧基姜黄素(P<0.01)双去甲氧基姜黄素(P<0.05)。2.四氢姜黄素(THC)固体分散剂对东莨菪碱致小鼠学习记忆障碍模型改善作用的研究:①不同剂量的四氢姜黄素均能降低小鼠在定位巡航实验中的潜伏时间(P<0.01),同时减少运动总距离(P<0.01)。空间探索显示,四氢姜黄素可增加小鼠在有效象限的运动时间及距离(P>0.05)。②T400(THC400mg/kg)组比模型组尼氏小体个数多于模型组,各组之间均无统计学意义。③高剂量(400 mg/kg)的四氢姜黄素固体分散剂可升高ChAT,降低AChE蛋白含量(P<0.05);④并能降低海马内MDA含量(P<0.01),升高SOD含量(P<0.05)。说明四氢姜黄素不仅可以调节乙酰胆碱的合成通路,并具有抗氧化作用。3.四氢姜黄素(THC)对H202诱导PC12细胞损伤的作用研究:通过CCK-8实验、过氧化氢为100umol/L时,PC12细胞存活率显著下降(P<0.01)。PI染色和Hoechst染色实验,发现H202+THC组与H202组相比,无明显差异(P>0.05)。但通过ROS检测细胞活性氧水平发现,H202+THC组较H202组ROS荧光信号明显降低(P<0.01)。结论:1.姜黄素类化合物固体分散剂对东莨菪碱引起的学习记忆困难,有明显改善作用,其作用机制可能是通过调节ChAT及AChE起效。2.四氢姜黄素固体分散剂可改善小鼠记忆能力,其作用机制可能是调节乙酰胆碱的合成和抗氧化共同作用下完成的。3.四氢姜黄素能抑制H202对PC12细胞所致的活性氧升高。