谷胱甘肽-S-转移酶是所有植物体内都存在的一类功能酶,大多数GST以可溶性二聚体酶的形式存在于植物体的各个组织。植物体内还原型谷胱甘肽(GSH)的醇基部位可与某些内源或外源有害物质的脂溶性分子的亲电子中心相偶联,将其催化为高水溶性、低毒的产物。本试验分析了高温胁迫下黄瓜GST基因的表达和酶活力变化,克隆了谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的开放阅读框序列,以其为目的基因,构建植物表达载体并转化拟南芥,获得了转基因拟南芥植株。对高温胁迫下的转基因拟南芥中GST基因表达、最大PSII光合量子产量、酶活力进行分析,主要结果如下:1、通过实时荧光定量PCR,和酶活测定,证明高温胁迫下黄瓜GST基因表达及酶活力显著上调。2、用PCR技术从克隆载体黄瓜中扩增出648kb的GST基因编码区,通过酶切、连接,转入改良的Super-1300载体获得新的表达载体改良的Super-1300-GST,并通过热激法导入大肠杆菌DH5α,得到了GST-1300-DH5α。3、将新的表达载体通过冻融法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens EHA105,获得工程菌GST-1300- EHA105。4、采用农杆菌介导法将GST基因转入拟南芥,筛选获得转基因拟南芥。PCR检测获得阳性植株;5、转基因拟南芥及其对照组经过72h 40℃高温处理后,qRT-PCR检测表明,GST基因的表达量有区别,进一步测定最大PSII光合量子产量后发现,高温处理后的转基因拟南芥植株中最大PSII光合量子产量普遍高于野生型拟南芥。