昆虫在长期演化过程中,形成了复杂的化学信息感知机制,高度发达的化学感受系统对于昆虫与环境中的化学信息联系具有重要作用。化学感受蛋白(chemosensory proteins,CSPs)可以识别寄主植物气味挥发物和信息素组分,在昆虫的化学感受系统中起着非常重要的作用,但目前对于其在化学感受系统中作用的分子机制并不明确。小地老虎Agrotis ipsilon(Hufnagel)属于鳞翅目夜蛾科昆虫,近年来在我国的发生危害日趋严重,主要为害玉米、棉花、高粱、烟草和蔬菜等作物幼苗。对该虫的化学感受蛋白的功能解析有助于探索其化学感受的分子机制,也可为利用信息素调节其种群密度和发生范围提供理论依据。更重要的是,可以为我们提供新的方法如通过干扰信息素类物质的识别过程对其进行有效防治。本文通过RT-PCR克隆了AipsCSP2基因,通过分析该基因序列可知其开放阅读框长度为360 bp,编码119个氨基酸,推导的氨基酸序列中有4个保守的半胱氨酸,符合典型的化学感受蛋白的结构特征;采用实时荧光定量qPCR技术研究了该基因在雌雄成虫不同组织的表达量,发现其在雌虫的性腺和雄虫的附腺中特异高表达,在其他部位基本不表达,时空表达谱显示该基因在雌虫羽化当天的性腺中表达量最高,并和羽化后几天在性腺中的表达量有显著差异;利用原核表达技术构建出表达载体并成功诱导AipsCSP2表达,SDS-PAGE分析发现AipsCSP2重组蛋白主要在包涵体中进行表达,利用阳离子交换层析柱对其进行纯化,最后得到该重组蛋白的浓度为0.48mg/mL;选取1-NPN为荧光探针,用荧光竞争结合试验测定了其与小地老虎和其他鳞翅目昆虫性信息素组分以及主要寄主植物挥发物的结合能力,结果显示该蛋白和小地老虎性信息素组分顺-11-十六碳乙酸酯的合成前体顺-11-十六碳醛有着极其强的结合能力,Ki值为1.48μM,表明其参与了其性信息素的合成过程。此外其和其他鳞翅目昆虫的醇类和醛类性信息素如十四烷醇、顺-9-十六碳醛、顺-7-十六碳醛也有着极其强的结合能力,和小地老虎性信息素组分顺-7-十二碳乙酸酯、顺-8-十二碳乙酸酯的结合能力为中等,和主要寄主植物挥发物结合较弱或者不结合。推测AipsCSP2蛋白可能主要参与了小地老虎性信息素的合成与识别过程,并在生殖活动中起着重要的作用。