论文部分内容阅读
本文以木糖为原料,C.shehatae CICC 1766为出发菌株,对木糖发酵工艺条件进行优化,并对其进行紫外和离子注入诱变得到一优良菌株SY58。
对本实验室3株利用木糖酵母主要发酵性能进行测定,综合耐酒精试验、不同糖浓度产气试验和摇瓶发酵试验结果,确定菌株C.shehatae CICC 1766为研究的出发菌株。对出发菌的发酵条件进行优化,结果表明,最适发酵温度为28℃,最适转速为160r/min,最适装液量150mL/250mL三角瓶,最适初始pH为4.5。响应面试验,优化出培养基中主要成分的添加量:木糖56g/L,玉米浆0.53%(v/v),尿素0.2g/L。并且添加适量的玉米浆可以缩短发酵周期24h。此时C.shehatae CICC 1766发酵木糖的乙醇产量为20.56 g/L。
对C.shehatae CICC 1766进行紫外诱变处理,通过TTC显色平板初筛,摇瓶发酵复筛,选出高产乙醇的突变菌株S28,乙醇产量为23.64g/L。继续对S28进行离子注入诱变,筛选出高产突变株SY58,乙醇产量为25.08g/L,比C.shehatae CICC 1766提高了21.98%;生物量为4.43g/L,比C.shehatae CICC 1766降低了11.4%。
对于C.shehatae来说,TTC验证平板能将乙醇产量较低的菌株淘汰。高剂量注入诱变时出现酵母菌落形态突变,实验结果表明菌落形态突变不利于乙醇的高产。
诱变后得到的高产菌株SY58进行5L罐木糖发酵试验,发酵周期缩短至52h,发酵比较彻底,最终酒精浓度25.04g/L,得率(乙醇/木糖)为0.41g/g,达到理论产量的89%。