目的：通过对Ⅲ、ⅣV期糖尿病肾病(证属气阴两虚、脉络瘀阻型)患者的临床观察,进一步评价芪卫颗粒临床应用的疗效性及安全性,并进一步实验研究芪卫颗粒对KK-Ay小鼠肾脏足细胞的影响及其内在作用机制。方法：临床研究依据随机对照双盲原则及《中药新药临床研究技术要求》,将来自于Ⅲ期临床分中心中国中医科学院广安门中医院的48例Ⅲ、Ⅳ期糖尿病肾病气阴两虚、脉络瘀阻型患者分为芪卫颗粒试验组36例,安慰剂对照组12例,进行为期12周的临床观察。试验中定期记录患者的生命体征、监测血糖、糖化血红蛋白,及血常规、尿常规加镜检、便常规、肝功能(AST、ALT、ALB)、肾功能(Cr、BUN)等安全性评价指标及有无不良反应的发生；同时定期检测患者的24h尿微量白蛋白及24h尿蛋白定量,观察中医证候疗效及进行肾功能评定。实验研究采用8周龄KK-Ay小鼠适应性喂养4周,将成模后的35只随机分为5组：模型组、厄贝沙坦组、芪卫低剂量组、芪卫中剂量组、芪卫高剂量组；另8只C57BL/6J设为正常对照组。实验中记录小鼠一般状况,体质量,血糖,24h尿蛋白定量。治疗10周后检测小鼠肾功能指标血清肌酐及尿素氮,血脂指标总胆固醇及总甘油三酯；并称取小鼠右肾重,切取小鼠肾组织做病理切片,行HE、Masson. PAS染色及透射电镜观察肾脏形态学改变,并制作WT-l免疫组化,结合软件分析计算小鼠肾小球足细胞数；Western Blot检测小鼠肾脏中nephrin, JNK和pJNK的蛋白表达,实时荧光定量PCR检测nephrin,α3integrin及βlintegrin mRNA的表达。结果：临床观察发现治疗12周后,芪卫颗粒可以有效改善气阴两虚、脉络瘀阻型糖尿病肾病的症状,中医证候疗效评定显示除去脱落4例病例外,芪卫颗粒组33例中显效3例,有效30例；并能有效降低24h尿微量白蛋白及24h尿蛋白定量,肾功能疗效评定显示芪卫颗粒组33例中临床控制14例,显效3例,总有效率达52%。治疗过程中两组患者在血压、血糖、糖化血红蛋白、内生肌酐清除率等指标监测都控制在合理水平,无明显变化。在安全性指标评价方面,芪卫颗粒组治疗前后及与安慰剂组对比,血常规、尿常规加镜检、便常规、肝功能(AST、ALT、ALB)、肾功能(Cr、BUN)均无明显变化,治疗过程中芪卫颗粒组未见不良反应发生。实验研究表明治疗10周后,与正常组相比,模型组KK-Ay小鼠体重、血糖、血脂(总胆固醇、总甘油三酯)、肾重、24h尿蛋白定量及血肌酐水平都显著升高(P<0.05)；芪卫颗粒低、中、高各剂量组较模型组在体重、血糖、血脂等方面均有不同程度减轻,并有效降低24h尿蛋白定量及改善血肌酐水平；芪卫颗粒各剂量组均有减轻肾重的趋势,但无统计学差异。对治疗10周后各组肾脏形态学观察：光镜下模型组肾小球中重度纤维化、肾小球系膜基质弥漫增生、基底膜明显增厚、球囊壁增厚及球囊粘连、毛细血管壁增厚明显、肾小管扩张伴上皮细胞空泡样改变、间质纤维化伴炎性细胞浸润、大量糖原蛋白沉积,部分肾小球可见kimmelstiel-wilson结节,芪卫颗粒各剂量组及厄贝沙坦组病理损害均有不同程度改善；电镜下模型组肾小球基底膜明显增厚,足细胞足突广泛融合、脱落明显,结构不清,芪卫颗粒各剂量组及厄贝沙坦组都不同程度减轻；WT-1免疫组化显示模型组足细胞个数明显减少,芪卫颗粒各剂量组及厄贝沙坦组足细胞数目均较模型组增加,能保护足细胞数目。同时,模型组nephrin蛋白及mRNA表达、α3integrin及βlintegrin mRNA相对表达量均明显减少,芪卫颗粒及厄贝沙坦组的治疗均不同程度增加其表达；模型组pJNK蛋白表达量明显增加,pJNK/JNK相对表达也显著增加,芪卫颗粒及厄贝沙坦组的治疗均不同程度下调表达量。结论：临床观察结果显示芪卫颗粒在治疗Ⅲ、Ⅳ期糖尿病肾病气阴两虚、脉络瘀阻型患者具有较好的疗效及一定的安全性。而动物实验进一步显示芪卫颗粒能够改善糖尿病肾病KK-Ay小鼠的糖脂代谢,减轻肾脏病理损害,保护足细胞,延缓糖尿病肾病进展。芪卫颗粒可能通过上调裂孔转膜蛋白nephrin、足突黏附基底膜受体蛋白a3β1整合素表达,抑制JNK信号转导通路的作用机制,减少糖尿病肾病小鼠足细胞损伤。