目的利用全反式维甲酸（all-trans retinoic acid, ATRA）制作大鼠肠神经系统（Enteric nervous system）发育异常的动物模型，应用蛋白基因产物9.5（protein geneproduct9.5, PGP9.5）及突触素(synaptophysin, SYP)动态观察ENS在胚胎发育过程的阳性表达及变化并进行透射电镜超微结构研究，以期了解ENS发育及ATRA是否诱导ENS异常发育，为临床防治ENS发育异常诱发的疾病提供实验基础。方法1.实验一40只健康成熟未孕的SD雌鼠，体重250～300g，由宁夏医科大学实验动物中心提供。雌雄大鼠按1：1比例于午夜合笼，上午8:10-9:10时检测有阴道栓排出的雌鼠，即认为已交配，此日标为妊娠第0天（Embryonic day0，E0），正常饲养。将已孕雌鼠30只随机分为2组，每组15只。实验组于E10将ATRA按100mg/kg一次性灌胃；对照组于E10给予体积(2.5mL/kg)橄榄油，继续饲养。两组分别于E14-20腹腔麻醉下行剖宫术。检查判定所有胚胎存活数量及畸形并记录。制作结直肠段标本，行HE常规染色及PGP9.5和SYP免疫组化。已知阳性切片作阳性对照，磷酸盐缓冲液代替一抗作空白对照。图像分析、采图、数据记录分析。2.实验二已孕母鼠8只随机分为2组，每组4只。实验组于E10将ATRA按100mg/kg灌胃；对照组于E10给予体积(2.5mL/kg)橄榄油，继续饲养。两组于E21腹腔麻醉下行剖宫术。制作结直肠电镜标本，预切片定位，超薄切片，透射电镜观察，拍片记录分析。结果1、免疫组织化学：（1）对照组: E16，在直肠肠壁内可见散在稀疏分布的棕色PGP9.5阳性细胞，直肠上端结肠壁内未能见SYP阳性细胞。从E16-18，PGP9.5环肌浆膜侧出现阳性细胞，成散在单个出现，粘膜下阳性细胞少见。直肠壁内可见SYP棕黄色成条索状的阳性表达，主要分布在肠壁浆膜下层。E20， PGP9.5阳性细胞呈黄褐色团簇状，环肌层和纵肌层结构清晰，排列整齐，粘膜下可见阳性细胞。SYP在E20阳性表达增强。（2）实验组: E16直肠肌间组织开始分化，结构整齐，PGP9.5在直肠中可显示散在分布的阳性细胞，与正常相比无明显改变，直肠大部分未见SYP阳性细胞。E18开始，近端直肠可见PGP9.5阳性表达，直肠壁内可见棕黄色成条索状的SYP阳性表达，但是与正常相比，发育滞后，体积较小，分布稀疏。E18-E20阳性细胞较正常组密度减低。2、透射电镜超微结构观察：（1）对照组：神经丛主要分布在环形肌和纵行肌之间，肌间结构排列整齐，细胞间质内可见微管、微丝、线粒体和密集的核糖体，有无髓神经纤维分布，轴突终末都有突触联系。（2）实验组：肌层肌间结构紊乱，可见轴突变性或偶见不典型突触结构，未见典型无髓神经纤维，微管、微丝显示不清，各种细胞器结构模糊，线粒体肿胀。不成熟神经胶质细胞分布，胶质细胞核膜有不规则突起，核固缩、染色质聚集，胞体相对较小，胞浆少。结论1、ATRA可诱导大鼠ENS发育异常，致畸率高。2、ENS的发育是一个逐渐成熟的过程。E16实验组和对照组形态无明显差异，随着胎龄的增加，实验组的ENS发育出现异常，且逐渐显著。3、E21实验组胚胎发育过程中其超微结构与正常组织结构不同。