肾癌是一种来源于肾实质小管上皮系统的恶性肿瘤,它是泌尿系统第二常见的恶性肿瘤,其发病率仅次于膀胱癌。最常见的肾癌病理类型是肾透明细胞癌。尽管一些新的靶向治疗药物已被批准用于晚期肾癌治疗,但肾癌患者的治疗效果并不成功。因此探究肾癌发病的分子机制,为获得更加有效的治疗手段提供参考依据显得十分重要。对整个肾癌基因组数据的分析可以帮助我们提高对肾癌的理解和识别新的抗癌靶点。因此,我们通过对TCGA数据库的生物信息学分析,发现杀伤细胞免疫球蛋白样受体2DL4(killer cell Ig-like receptor2DL4,KIR2DL4)的m RNA在肾癌中表达增加(P<0.05),在基因组中的拷贝数也同样增加(P<0.05),并通过免疫组化方法证明KIR2DL4确实在肾癌中表达。但是并未得出有统计学意义的差异,这可能是由于样本量过小(3例)造成的。随后,我们将插入到Plenti载体中的KIR2DL4 c DNA和对照空载体通过慢病毒感染的方式插入肾透明细胞癌细胞系Caki-1和769-P细胞基因组内,并通过嘌呤霉素筛选出稳定细胞株。然后,通过MTT细胞活性实验和软琼脂克隆形成实验发现KIR2DL4过表达可以促进体外培养的Caki-1和769-P细胞的增殖能力(P<0.05)。为进一步评价KIR2DL4在肾透明细胞癌增殖生长中的作用,我们在动物模型中检测了KIR2DL4的过表达是否促进了肾癌细胞的生长。在BALB/c-nu/nu小鼠中,由KIR2DL4过表达的Caki-1细胞形成的肿瘤比对照Caki-1细胞形成的肿瘤出现得更早,生长得更快。同时,我们敲低Caki-1细胞中KIR2DL4的表达。通过MTT实验检测sh KIR2DL4组的增殖能力。结果显示,下调KIR2DL4可以抑制Caki-1的增殖(P<0.05)。同时,软琼脂克隆实验也得到了同样的结果(P<0.05)。最后,我们还采用细胞转录组测序的手段,对稳转的Caki-1-p Lenti-KIR2DL4和Caki-1-p Lenti-NC进行了差异表达分析。发现改变KIR2DL4表达后,肿瘤相关通路以及PI3K-Akt信号通路的相关蛋白出现了转录组水平的改变。此外,敲除KIR2DL4降低了Caki-1细胞中的p-ERK和NF-κB蛋白水平,而过表达KIR2DL4则增加了p-ERK和NF-κB的水平。综上所述,实验结果提示KIR2DL4与肾透明细胞癌的细胞生长增殖密切相关,在体内及体外可能会通过相关分子机制促进肾透明细胞癌细胞的增殖活性。我们有理由相信KIR2DL4可能是肾透明细胞癌的促癌基因,有望成为肾透明细胞癌临床治疗的有效靶点。