AngⅡ/AT1R在三株膀胱癌细胞株中的表达及意义

来源 :昆明医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:kuo1314
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
目的:检测AngⅡ/AT1R在三种不同来源的膀胱癌细胞中的表达,研究AT1R的表达与细胞增殖、迁移及侵袭能力的关系,比较三株膀胱癌细胞株(EJ-M3, EJ, BIU-87)的增殖、迁移及侵袭生物学特性的不同,探讨AngⅡ对三株细胞增殖、迁移和侵袭力的作用,为寻找膀胱癌新的治疗方法提供实验数据和靶点。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应技术(qRT-PCR)检测三株膀胱癌细胞株中AT1R的mRNA表达;用Western Blot(蛋白免疫印迹法)检测三种膀胱癌细胞中AngⅡ/AT1R的蛋白表达;应用MTT法检测三株不同膀胱癌细胞增殖能力,观察AngⅡ对细胞增殖能力的影响;通过细胞划痕实验检测三株不同膀胱癌细胞迁移力的情况,观察AngⅡ对细胞迁移运动性的影响;采用Transwell体外细胞侵袭实验检测三种膀胱癌细胞株侵袭和运动性变化,观察AngⅡ对细胞侵袭力的影响。结果:通过qRT-PCR实验:三株膀胱癌细胞中AT1R的mRNA表达均成阳性,且AT1R mRNA的相对表达量EJ-M3(15.43±0.5533), EJ(4.23±0.5951), BIU-87(1),三组细胞之间两两比较差异有统计学意义(p<0.01)。应用Western Blot实验:三株膀胱癌细胞中AngⅡ的蛋白表达均成阴性,ATlR的蛋白表达均成阳性,电泳条带相对光密度值EJ-M3(0.6891±0.1264), EJ (0.5198±0.1223), BIU-87(0.0252±0.0112),三组细胞之间两两比较差异有统计学意义(p<0.05);利用MTT法检测:三株膀胱癌细胞在1O-4mol/L、10-5mol/L、10-5mol/L AngⅡ实验组与对照组(不加AngⅡ)中,EJ-M3实验组吸光值(0.6096±0.02334,0.6089±0.03513,0.6115±0.0248)与对照组吸光值(0.615±0.0284,0.6134±0.02788,0.6155±0.02244)比较差异无统计学意义(p>0.05),EJ实验组吸光值(0.5219±0.01962,0.5211±0.02105,0.5231±0.02197)与对照组吸光值(0.5266±0.01798,0.524±0.01922,0.5184±0.02285)比较差异无统计学意义(p>0.05),BIU-87实验组吸光值(0.4998±0.00793,0.4964+0.01156,0.4971±0.01335)与对照组吸光值(0.5009±0.00893,0.4794+0.01247,0.4968+0.01247)比较差异无统计学意义(P>0.05)。说明10-4mol/L、10-5mol/L、10-6mol/L AngⅡ对三株膀胱癌细胞无明显增殖影响;细胞划痕实验表明:三株细胞应用Ang Ⅱ实验组与对照组(不加AngⅡ)比较,在12h,24h,36h迁移至划痕区的细胞数:EJ-M3实验组迁移细胞数(19.2±1.54919,57.2±3.48967,133.6±4.14193)均多于对照组(10.1±1.3703,47±2.10819,122.7±4.1379)差异有统计学意义(p<0.05),EJ实验组迁移细胞数(16.2±1.4757,52.7±3.093,110.1±3.90014)均多于对照组(8.3±0.94868,39.3±2.66875,97.7±3.49763)差异有统计学意义(p<0.05),BIU-87实验组迁移细胞数(13.1±2.13177,48.6±2.633,96.5±3.77859)均多于对照组(7.7±1.25167,37.1±2.64365,78.8±2.39444)差异有统计学意义(p<0.05),且三株细胞之间迁移细胞数两两比较差异有统计学意义(p<0.05);通过Transwell侵袭实验:应用AngⅡ实验组与对照组(不加AngⅡ)比较,EJ-M3实验组侵袭细胞数(119.5±3.71932)均多于对照组(66.2±3.35989)差异有统计学意义(p<0.01),EJ实验组侵袭细胞数(55.2±2.93616)均多于对照组(33.5±3.24037)差异有统计学意义(p<0.01),BIU-87实验组侵袭细胞数(37.6±3.30656)均多于对照组(20±1.8574)差异有统计学意义(p<0.01),且三株细胞之间侵袭细胞数两两比较差异有统计学意义(p<0.01)。结论:三株膀胱癌细胞的生物学特性有差异,不同来源的膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力不同,在AngⅡ作用下膀胱癌细胞的迁移及侵袭能力增强,而对于增殖无明显影响。AT1R的表达与膀胱癌细胞增殖、迁移及侵袭能力呈正相关,AngⅡ/AT1R生物学轴在膀胱癌侵袭转移过程中扮演了重要角色,这为膀胱癌的治疗提供了新的可能的靶点。
其他文献
研究目的:肿瘤的发生伴随着癌基因的激活或者抑癌基因的失活,研究这些基因的功能,有助于肿瘤的靶向治疗。ARHI是母源性肿瘤抑制印迹基因,在卵巢癌中失表达。本课题研究卵巢癌细胞
云计算技术的提出,出现了一种可以解决审计信息孤岛问题的新技术云服务。运用云技术,可以科学、合理的对数据资源进行归类、整合,为审计人员提供一个数据资源共享的有效平台,
目的:1.1.建立从原始卵泡培育具有良好发育潜能的MⅡ卵的组织工程技术方案;2.2.从原始卵泡培育MⅡ卵制备胚胎干细胞;3.3.为人卵巢工程建立实验基础。方法:新生0.5d小鼠卵巢切片异
采用主动式PFC方法,在保证电流谐波抑制效果的前提下,解决了空调压缩机最高转速限制难题。与被动式PFC方法相比,在-15℃~2℃室外温度范围内,主动式PFC方法的低温制热量提升12
<正>9月30日,美国国务卿蒂勒森在访华期间面向媒体公开承认美国与朝鲜就核问题保持着直接联系,"有两三个渠道","没有放弃外交解决"。第二天,美国总统特朗普发推特说:"我已告
以习近平总书记为核心的党中央提出健康中国的国家发展战略,推动健康中国建设对于我国全民健身的发展是机遇也是挑战,需要更加准确把握新时期全民健身发展内涵。运用公共政策
目的:研究重组质粒pEGFP-N1-IL-24基因及pGEG-IL-12基因单独应用与联合应用对小鼠黑色素瘤移植瘤的抑制作用及作用机制。方法:复苏培养B16细胞株,取6周龄C57BL/6小鼠,背部接种,
本报讯(记者伍欣)日前,国务院总理李克强签署国务院令,公布《社会救助暂行办法》(以下简称《办法》,全文详见今日4版)。《办法》共13章70条,自2014年5月1日起施行。$$ 《办法
学位
本文的课题是秘鲁阿雷基帕圣玛利亚天主教孔子学院的汉语学习者对中国文化的需求分析,以阿雷基帕孔子学院为基点,以实证研究为导。笔者尝试在对外汉语的文化领域中引入“需求
目的和意义原发性肝癌,简称肝癌,是第三位导致癌症相关死亡的疾病。射频消融术是临床上最常用的治疗肝癌的重要手段之一。由于射频消融术本身的限制导致一次性毁损体积有限,造成