红脂大小蠹、舞毒蛾和松树蜂是国际上重要检疫性害虫,幼虫阶段与其近缘种在形态学方面很难区分,加上传统饲养鉴定的方法操作复杂、耗时长,因而,给实际检疫工作带来巨大困难。如何能够对以上检疫害虫作出快速有效检测,对于保护我国的生态安全具有重大意义。分子生物学技术的发展使快速准确鉴定物种成为可能。目前,在农业和医学等领域广泛应用,已有学者成功研制出马铃薯y病毒和皮肤藓菌病等分子检测试剂盒,但应用于以上三种检疫性害虫的分子快速检测试剂盒还未见报道。本实验采用DNA条形码技术(DNA barcoding),选取昆虫COI基因特异性片段进行扩增,采用金牌DNA聚合酶(Golden Star T6 DNA polymerase),成功组装出红脂大小蠹、舞毒蛾、松树蜂三种检疫性害虫的分子快速检测试剂盒,试剂盒能够在2小时内快速准确的鉴定出以上三种检疫害虫。此外,论文还对该试剂盒的检测效果进行了特异性和敏感性评价,并编制了试剂盒的使用说明书,为今后此类检疫害虫试剂盒的商品化生产提供了技术支持。